ANA CATALINA KEMPFER

Datos académicos

Lugar de trabajo CONSEJO NACIONAL DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Y TECNICAS / INSTITUTO DE MEDICINA EXPERIMENTAL | ACADEMIA NACIONAL DE MEDICINA DE BUENOS AIRES / INSTITUTO DE MEDICINA EXPERIMENTAL
Título Doctora de la Universidad de Buenos Aires
Grado Universitario de posgrado/doctorado
Especialidad -Para analizar si los niveles de CIC son dependientes de las mediciones relacionadas a ADAMTS13 se optimizará el ensayo para evaluar los CIC. Para la elección del anticuerpo que capture los CIC con alta sensibilidad se están estudiando 3 anticuerpos. Se diseñará el ELISA y se evaluará la sensibilidad de los anticuerpos utilizando un paciente considerado positivo. Se harán distintas diluciones y se observarán los resultados de OD. Se utilizará el mismo anticuerpo para la detección CIC por western blot (WB). Se obtendrán por scanning densitométrico y análisis de imágenes los resultados del WB. Se correlacionarán los resultados de ELISA y WB. En la elección del anticuerpo se utilizará un ensayo definitorio que es la producción de CIC al realizar el ELISA. Para realizarlo se eligen pacientes con anti-ADAMTS13 libre de IgG y se le agrega ADAMTS13 a distintas concentraciones. Si el anticuerpo es sensible se observa el incremento de IgG respecto a la ADAMTS13 agregada. -Con el objeto de justificar los niveles de ADAMTS13 que presentan los pacientes con PTT congénita se realizan los estudios genotípicos del mismo y su grupo familiar y el análisis in silico. También se calculará la prevalencia de las mutaciones en los pacientes estudiados según Agresti-Coull. Familia 1 Paciente de sexo masculino diagnosticado con PTT a la edad de 37años, con manifestaciones de trombocitopenia y de función renal alterada. La ADAMTS13 act (valor normal: 40-130%), ADAMTS13 ag (0.60-1.60ug / ml) y anti-ADAMTS13 libre de IgG (<15 U / ml) se evaluaron por ELISA y los multímeros extragrandes del VWF (ULVWF) (<15% ), mediante electroforesis en gel SDS-agarosa. La act de ADAMTS13 = 0%, el ag = 0ug / ml, IgG anti-ADAMTS13 anticuerpo = 8U / ml, multímeros ULVWF = 58%. Los resultados genotípicos indican una mutación conocida(c.4085 T>A) y una nueva(c.774_775 insccgcgcc)ambas en estado heterocigota. Los resultados fenotípicos del padre y hermana son: la actividad ADAMTS13 = 46 y el 56% y el antígeno = 0,67 y 0.90ug / ml, respectivamente; ambos anticuerpos anti-ADAMTS13 IgG = 8U / ml. Falta completar los estudios genotípicos del padre y hermana y el análisis in silico. Familia 2 El paciente presenta episodios recurrentes de trombocitopenia, dolor de cabeza, ictericia y dolor abdominal desde los 14 años. Se realizaron las pruebas fenotípicas descritas y la detección de anticuerpos anticardiolipina (ACA) Los resultados del el paciente son VWF: Ag = 158%, la act = 2,1%, ag=0.02ug/ml e IgG anti-ADAMTS13 = 4.3u/ml . Posee una mutación conocida (c.4085A>T) y dos mutaciones nuevas(c.2610+5G>C, c.2677C>G). Los padres y hermanos tenían VWF normales: Ag y ADAMTS13 actividad y antígeno, pero la hermana mostraron 27U/ ml de anticuerpo IgG anti-ADAMTS13. Ninguno de ellos fue positivo para ACA. Falta completar los estudios genotípicos de la familia y el análisis in silico. Familia 3 La paciente presentó púrpura e ictericia, con anemia hemolítica, trombocitopenia y reticulocitosis al nacer, seguido de varios episodios durante su primer año de vida. Se realizaron las pruebas fenotípicas descritas. Los resultados fenotípicos indicaron que no tenía actividad detectable de ADAMTS13, ag: 0.04ug / ml, el anticuerpo anti-ADAMTS13 IgG = 5U / ml y ULVWF = 53%. Los resultados genotípicos indicaron un componente hetero cigota para una mutación conocida (c.1225C>T) y una nueva (c.2321delG) El padre y la madre no mostraron manifestaciones clínicas y valores de la actividad de ADAMTS13 de 53 y 52%, respectivamente, de anticuerpos IgG anti-ADAMTS13 = 2U /ml y ULVWF normales mientras el antígeno fue de 0,58 y 0,65 mg / ml, respectivamente. Falta completar los estudios genotípicos del padre y madre y el análisis in silico. -Continuará evaluando ADAMTS13 (actividad, antígeno, IgG anti-ADAMTS13 e inhibidor) para ayudar en el diagnóstico y el tratamiento correspondiente de pacientes con PTT congénita, adquirida y con sindrome urémico hemolítico atípico. Continuará con el dosaje del enlace del VWF al colágeno como participantes del WHO international external quality assessment scheme for blood coagulation. Esta participación permite reforzar los controles de calidad en sensibilidad y exactitud. Desde que descubrió que reemplazando los calibradores del kit de Technozym por los calibradores del WHO de 6% y 34% los resultados entraron en consenso.

PRODUCCION CIENTÍFICO TECNOLÓGICA