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Las tareas propuestas se desarrollarán sobre la base de los siguientes subsidios solicitados:
a) Proyecto UBACyT 2016: Especies reactivas de oxígeno en sepsis y apoptosis: estudios en ratas y levaduras
Director: Carlos Stella. Integrantes: Manuel Alonso, Sebastián Chapela, Federico Camicia e Isabel Burgos.
b) Proyecto UBACyT 2016: Estudio farmacológico y funcional de receptores acoplados a proteínas G involucrados en la neurotransmisión serotonérgica en Echinococcus granulosus y otros parásitos cestodes
Director: Laura Kamenetzky Integrantes: Federico Camicia, Carlos Stella
Ensayos de crecimiento de levaduras en condiciones de anaerobiosis y microaerofilia. Efecto sobre la inhibición del crecimiento por ayuno de nutrientes.
Selección de distintos medios de cultivo y técnicas para la realización de ensayos.
Aislamiento y control de ADN de transformantes.
Transformación de levaduras y bacterias competentes.
Preparación de soluciones y medios de cultivo para levaduras y bacterias.
Aplicación de técnicas de biología molecular e Inmunohistoquimica.
Preparación de protocolos para dispositivos de enseñanza (Kit) empleando levaduras Saccharomyces cerevisiae, como sistema modelo.
Medida del aporte de oxígeno por situaciones de isquemia o hipoxia que implican diferentes daños a nivel celular
Medición de Especies Reactivas de Tiobarbituricos (TBARS)
Capacitación de alumnos en protocolos básicos de microbiología de levaduras y bacterias.
Preparación de protocolos en cursos para personal Auxiliar de Laboratorio.
Participación en tareas de apoyo a la investigación:
Realización de manuscritos, resúmenes y posters para la asistencia a Reuniones Científicas (SAB, SAIB).
Preparación de informes (UBA-CONICET); realización de pedidos y rendiciones de subsidios mediante los formularios de Innova T.
Cálculo y ajuste de datos experimentales con programas de computación.
Metodología
Las tareas a desarrollar se realizarán en base a la metodología de nuestros trabajos publicados y los correspondientes a otros autores
1. Transporte de aminoácidos: se determinará en efecto de la anaerobiosis sobre la incorporación del aminoácido L-leucina en presencia y ausencia de N-Acetilcisteína o Idebenona.
2. Viabilidad celular en ciclos de hipoxia/re-oxigenación de levaduras: para tal fin se determinará la viabiliad en ensayos de incubación en jarras de anerobiosis.
3. Levadura y daño oxidativo: se evaluará el estrés oxidativo por determinación de los niveles de Diclorofloresceina diacetato y TBARS,
4. La levadura S.cerevisiae para la enseñanza de Ciencia: se desarrollarán protocolos de enseñanza para la presentación de kit con el objetivo de evaluar el efecto de inhibidores de la glucólisis (Dicloroacetato) sobre el crecimiento celular.
5. Caracterizar la función de los receptores involucrados en la respuesta motora observada a la serotonina mediante el empleo de un sistema heterólogo. Caracterización funcional de los genes codificantes para receptores de serotonina en Cestodes en células de levadura. La funcionalidad de dichos receptores se evaluará a través de la medición en el aumento o disminución del crecimiento de levaduras auxótrofas para histidina.
Referencias
Alonso M, Stella CA. Teaching nutritional biochemistry: an experimental approach using yeast. Adv Physiol Educ. 2012, 36 (4):313-8.
Gamondi O, Chapela S, Nievas I, Burgos I, Alonso M, Stella CA. Idebenone treatment mediates the effect of menadione oxidative stress damage in Saccharomyces cerevisiae.
Drug Metab Lett. 2012 6 (2):120-3.
Sáenz D.A., Chianelli M.S., and Stella C.A.. L-Phenylalanine Transport in Saccharomyces cerevisiae: Participation of GAP1, BAP2, and AGP1. Journal of Amino Acids. 2014. 1: 1-10.
Transmembrane Signaling Protocols. Second Edition. Edited by Hydar Ali. Marcin Majka and Mariusz Z. Ratajczak. Capítulo 5: Functional Expression of CXCR4 in Saccharomyces cerevisiae in the Development of Powerful Tools for the Pharmacological Characterization of CXCR4 pág. 115
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(Academic Press Ltd - Elsevier Science Ltd, 2008-12)
(International Journal of Scientific Engineering and Applied Science, 2021-07)
(Sociedad Brasilera de Bioquímica y Biología Molecular, 2019-12)
(American Society for Microbiology, 2001-05)
(Bentham Science Publishers, 2011-08)
(Scientific Research Publishing, 2022-07-23)
(Hospital Británico de Buenos Aires, 2021-07-27)
(Sociedade Brasileira de Microbiologia, 2022-02-05)
(Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular, 2016-06)
(Landes Bioscience, 2018-11)
(Termedia Publishing House Ltd, 2020-12)
Artículo Synergistic Effect of Dichloroacetate and Fluconazole on the Growth of Saccharomyces cerevisiae(JSciMed Central, 2022-04)
(John Wiley & Sons Inc., 2007-05-03)
(TextRoad Publication, 2017-10)