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Tareas que se enmarcan dentro del proyecto "ESTUDIO Y OPTIMIZACIÓN DE LA REMOCIÓN DE METALES PESADOS POR MICROORGANISMOS REGIONALES". Objetivo: Aislar microorganismos resistentes a metales pesados a partir de efluentes fabriles de la provincia de San Luis, evaluar y optimizar su capacidad de remover metales pesados (cobre, cromo, cadmio, otros) a escala de laboratorio. Aislamiento de microorganismos. A priori y en base a experiencia adquirida, las muestras serán diluidas previo su siembra en medios sólidos (agar-agar o gelano) para obtener colonias separadas y con ello, luego de incubación por varias semanas, evitar el desplazamiento de los microorganismos de crecimiento más lento. Dentro de los medios salinos para aislamiento de quimilitótrofos, se utilizarán 9K+ y VL 55 modificado (sin extracto de levadura y menor pH), este último útil en el aislamiento de un amplio rango de bacterias de suelo, ambos complementados con material mineral obtenido por lavado de muestras de suelo o de los drenajes ácidos. Para quimioheterótrofos como Sulfobacillus spp., Leptospirillum spp., Acidimicrobium spp., los medios serán suplementados con extracto de levaduras. Para aislamiento de Acidithiobacillus spp. se utilizará el medio salino basal (HBS) suplementado con elementos traza o similares. Serán usados medios ricos diluidos, como el Agar K que ha demostrado ser útil para acidobacteria y firmicutes de difícil aislamiento. En todos los medios se utilizaran soluciones de metales pesados como (cobre, cromo o cadmio) como presión de selección. A aislamientos seleccionados por su resistencia a metales pesados serán identificados por criterios convencionales: morfología y fisiología según manual de Bergey y técnicas moleculares (la amplificación del ADN ribosomal 16S) 2. Estudiar la capacidad biorremediante de las cepas resistentes a metales pesados en medios de cultivo líquido 2.1. Condiciones de cultivo. El crecimiento de las cepas seleccionadas será llevado a cabo en el medio diseñado o seleccionado para tal fin como e Medio mínimo (MM) desarrollado por Amoroso y col. (1998). Se realizarán cultivos en lote suplementados con Cu(II, Cr(VI) y Cd(II) en forma independiente y simultáneamente en un rango de 10 ppm a 40 ppm. Se inocularán suspensiones de cada cepa y se incubarán en un rango de temperaturas de 25 a 45 ºC. Se utilizarán como control, cultivos incubados en las mismas condiciones pero sin la adición de los metales pesados. 2.2. Determinación del crecimiento celular. El crecimiento de las cepas se evaluará de acuerdo a las circunstancias de que se trate cada cultivo: a) cultivos únicos. El crecimiento se determinará por medidas de absorbancia, peso seco y unidades formadoras de colonias. b) cultivos mixtos o consorcios. El crecimiento total de la población se determinará mediante peso seco. Mientras que el crecimiento de cada individuo de la población se lo determinará por técnicas moleculares como DGGE o PCR en tiempo reales y por técnicas convencionales como morfología o aspecto de las colonias. 2.3. Evaluar la remoción de metales pesados en los cultivos, en medios líquidos. La concentración inicial y residual al final del periodo de incubación se evaluará en sobrenadantes de los cultivos libre de células se realizara por espectrometría de absorción atómica En el caso de Cr(VI) se determinara colorimétricamente por reacción con 1,5-difenilcarbazida (DFC) en solución ácida (APHA, 2005). 3. Optimizar la capacidad biorremediadora de la o las cepas seleccionadas. En primera instancia se evaluará el efecto de diferentes variables (fuente de carbono, fuente de nitrógeno, fuente de fosforo, presencia de oxaniones, presencia de cationes, etc.) sobre el crecimiento y la capacidad de remoción de metales pesados antes mencionados así como la remoción simultánea de los mismos por la o las cepas seleccionadas. Las variables seleccionadas en esta etapa (niveles de confianza mayores que el 85%), serán posteriormente optimizadas empleando la metodología de diseño factorial. Los niveles de las variables serán oportunamente fijados.
DESARROLLO DE UNA NUEVA LINEA "METABOLITOS MICROBIANOS Y BIOTECNOLOGÍA"
Por otro lado se propone continuar con la temática de la tesis de Maestría defendida el 1 julio de 2015 e incorporarla como una nueva linea dentro del grupo de microbiología ambiental del INQUISAL dirigido por la Dra. Liliana Villegas. Dentro de esta linea se desarrollara
la identificación de los metabolitos antifúngicos producidos por cepas bacterianas con capacidad quitinolítica aisladas a partir de guano de murciélagos. Dirección de tesis de grado.
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Título del libro: Strategies for Bioremediation of Organic and Inorganic Pollutants- Otros responsables: Fuentes, María S. Colin, Verónica L. Sáez, Juliana M. - (CRC Press - Taylor & Francis Group, 2018)
(Tech Science Press, 2021)
(Asociación Argentina de Microbiología, 2019)
(Sociedad de Biología de Cuyo, 2022)
(Argentina Asociación Civil, 2023)
(Springer, 2021-07)
(Springer Heidelberg, 2021-03)
(Sociedad de Biología de Cuyo, 2023)
(Wiley VCH Verlag, 2016-11)
Capítulo de Libro Trabajo, relaciones laborales y territorio: Reorganización regional de la trama productiva automotriz en Zárate y CampanaTítulo del libro: Empresas multinacionales en la Argentina: Representación, inserción sectorial y trabajo- Otros responsables: - (Universidad Nacional de General Sarmiento, 2022)