Aplicación de bacteriófagos en la reducción de biofilms Escherichia coli productor de toxina Shiga

Abstract

Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) puede formar biofilms, que son comunidades de microorganismos embebidas en una matriz de exopolisacáridos, donde adquieren mayor resistencia ante procedimientos de desinfección y limpieza. Los bacteriófagos y sus enzimas fágicas podrían ser una herramienta efectiva y segura para resolver problemas asociados a STEC en la industria alimentaria. Para su aplicación como una herramienta en biocontrol deben seleccionarse aquellos que sean estrictamente líticos. Nuestro objetivo fue evaluar el efecto de 3 bacteriófagos líticos (F1, F2 y F3) sobre biofilms formados por STEC. Trabajamos con tres cepas STEC correspondientes a los serotipos O91:H21 (cepa 1) y O174:H21 (cepas 2 y 3), que cultivamos para favorecer la formación de biofilms en placas de 96 pocillos por 48 h a 37°C. Luego de retirar el medio de cultivo, tratamos 3 pocillos de cada cepa con una suspensión de alto título de cada bacteriófago y otros 3 se dejaron como control agregándoles el mismo volumen de caldo de caldo de Lisogenia. Continuamos la incubación a 37°C por 24 h; posteriormente realizamos la tinción de los biofilms formados con cristal violeta y medimos la DO a 570 nm. Realizamos el ensayo en tres eventos independientes. Según el valor de DO clasificamos a las cepas por su capacidad de formar biofilms en 4 categorías: no formadoras (NFB), débiles formadoras (DFB), moderadas formadoras (MFB), y fuertes formadoras (FFB). Las cepas 2 y 3 resultaron MFB y la cepa 1, FFB. Observamos reducciones del 56,4 y 51,3% del biofilm producido por la cepa 1 por tratamiento con los bacteriófagos F1 y F2, respectivamente, y del 51,8% del biofilm producido por la cepa 3 por el bacteriófago F3. Podemos concluir que los 3 bacteriófagos evaluados representan una estrategia alternativa para el control de biofilms formados por cepas STEC.