Aislamiento de Leptospira spp. en tejido renal de roedores silvestres y sinantrópicos

Abstract

Leptospira spp. es una espiroqueta causante de la leptospirosis, zoonosis que tiene un impacto negativo en la salud pública y en la economía. Diferentes especies de roedores silvestres y sinantrópicos actúan como hospedadores de mantenimiento del agente infeccioso, contaminando el ambiente con orina, constituyendo un riesgo para los humanos y animales que pueden infectarse a través del contacto directo o indirecto. El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de Leptospira spp. a partir de tejido renal de roedores silvestres y sinantrópicos a través de la técnica de aislamiento bacteriano. Se capturaron en total 30 roedores en un área rural del partido de Tandil, resultando una tasa de captura del 16%. Esta actividad fue avalada por el Comité de Bienestar Animal de la Facultad de Ciencias Veterinarias (FCV – UNCPBA) Res CA 087/02, número de expediente 13/2016. El procesamiento fue in situ obteniéndose dos riñones por animal capturado. Las muestras fueron identificadas y codificadas según la especie del roedor. Posteriormente se transportaron al laboratorio en frascos individuales con solución buffer fosfato salino, adicionada con 200mg/L del inhibidor 5-Fluorouracilo (5-Fu). Para la detección de Leptospira spp. se extrajo una alícuota de 0,1mL del tejido renal en solución y se realizó el cultivo con dos agentes selectivos diferentes: el primero utilizando medio selectivo EMJH semisólido + 5-Fu. El segundo, en medio EMJH semisólido con sulfametoxazol, trimetoprima, anfotericina, fosfomicina y 5-Fu (STAFF). En ambos casos el cultivo se realizó a 28ºC observando semanalmente posibles desarrollos a través de microscopía de campo oscuro y microscopía de fluorescencia, y realizando subcultivos. Hasta la fecha, los cultivos continúan en observación. En una de las muestras cultivada en medio EMJH + STAFF se observó crecimiento. Se confirmó la presencia de una cepa patógena de Leptospira mediante PCR 16S ARNr, posteriormente mediante MLST. La muestra positiva correspondió a un roedor de la especie Akodon azarae. Este hallazgo permite sugerir que la adición de agentes selectivos mejoraría el diagnóstico y que en las áreas rurales del partido de Tandil pueden encontrarse roedores infectados con leptospiras patógenas, lo cual significa un riesgo potencial para las personas y los animales domésticos.