Role of polyamines during in vitro rhizogenesis of Nothofagus nervosa using successive culture media

Abstract

En este trabajo se presenta un protocolo de enraizamiento in vitro para la obtención de micro-plantas de Nothofagus nervosa usando medios sucesivos durante el cultivo de tejidos. Los cambios cualitativos y cuantitativos de putrescina, espermidina y espermina en los tejidos durante el enraizamiento, y su correlación con otros marcadores bioquímicos y cambios morfológicos, justifican su uso en el desarrollo de medios sucesivos de enrizamiento para N. nervosa, así como el uso de sus inhibidores. La concentración de poliaminas en los tejidos fue máxima antes de la emergencia de las raíces (espermina alcanzo los 100 nmol/g PF para decrecer hasta 50 nmol/g PF en los días siguientes), siendo su concentración menor en los mejores medios de enraizamiento (197 nmol/g PF comparado con 264 nmol/g PF del medio control). Se puede concluir que las poliaminas mejoran cualitativamente y cuantitativamente el enraizamiento in vitro, siendo el mejor medio sucesivo aquel que incluyo 10 lM de espermina durante la fase de expresión del enraizamiento.An in vitro rooting protocol for producing Nothofagus nervosa microplants using successive steps during tissue culture is reported. Qualitative and quantitative changes in putrescine, spermidine, and spermine tissue contents, during the rooting process and their correlation with other biochemical markers and morphological changes, provided the rationale for their use during the study of a successive in vitro culture protocol for N. nervosa, as well as the use of their inhibitors. The polyamine tissue content was maximum before root emergence (spermine raised to 100 nmol/g FW to later decreased to ca. 50 nmol/g FW in the following days), but it was lower in improved rooting media (197 nmol/g FW compared to 264 nmol/g FW of the control medium). It was concluded that polyamines qualitatively and quantitatively improve in vitro rhizogenesis, and the best successive culture media included 10 lM spermine during the expression phase.