Diferencias en la producción de verotoxinas entre aislamientos de Escherichia coli verotoxigénico

Abstract

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) es un patógeno entérico que produce colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH) en humanos. En Argentina el SUH es endémico, siendo el ganado bovino el reservorio más importante de VTEC. El principal factor de virulencia es la producción verotoxinas (VT1 y VT2), responsables de muchas de las características patológicas y de las complicaciones severas de la infección por VTEC. La expresión de las verotoxinas está ligada al ciclo lítico del fago y su liberación depende de la lisis de la bacteria. El objetivo del trabajo fue detectar diferencias en la producción de VT entre distintos aislamientos VTEC de origen bovino. Se seleccionaron aislamientos correspondientes a los serotipos aislados con mayor frecuencia de casos de SUH en nuestro país (O157:H7 y O145:H-), así como aquellos portadores de la variante emergente vt2g. La producción de la toxina en sobrenadantes de los cultivos con y sin inducción con mitomicina C (0,5µg/ml) se cuantificó con un ELISA de captura comercial (Ridascreen). Los resultados de los sobrenadantes sin diluir permitieron clasificar a los aislamientos en positivos o negativos en cuanto a la producción de VT pero no permitieron detectar diferencias entre aislamientos inducidos y no inducidos, ni tampoco entre diferentes variantes de VT. Debido a ello, se ensayaron diferentes diluciones de los sobrenadantes. La dilución 1/2000 permitió identificar aislamientos vt2-positivos con una elevada producción de VT en condiciones inducidas (O157:H7 y O145:H-), mientras que para el resto de los aislamientos dio negativo. La producción de VT de los aislamientos vt1- positivos inducidos pudo detectarse con la dilución 1/200. En ausencia de mitomicina C, la dilución 1/5 permitió identificar un aislamiento con menor producción basal de VT. Las diluciones seleccionadas permitieron detectar diferencias en cuanto a la producción de VT de estos aislamientos, que se correlacionaron con datos previos de citotoxicidad.