Detección por biología molecular de patógenos asociados a infertilidad en los bovinos, a partir de ADN extraído de muestras prepuciales derivadas al laboratorio en medios de cultivo del protozoario Tritrichomonas foetus

Abstract

Los problemas reproductivos en bovinos son una de las principales causas depérdidas económicas en sistemas ganaderos. El diagnóstico es complejo por sermulticausal, implicando agentes físicos, químicos y biológicos. Entre los agentesposibles en este estudio hemos priorizado Campylobacter fetus, Tritrichomonasfoetus y Leptospira sp. La optimización de métodos diagnósticos es necesario paratomar las medidas sanitarias adecuadas previo al servicio. El objetivo de estetrabajo fue extraer material genético óptimo a partir de muestras de esmegmaprepucial de toros cultivadas en medio específico para T. foetus durante 15 días, afin de realizar la detección molecular de agentes abortigénicos. Se analizaron 43muestras de toros pertenecientes a establecimientos de la Provincia de BuenosAires, cultivadas en medio Diamond. Se optimizó un protocolo de extracción deADN utilizando kit comercial, realizando modificaciones específicas para elprocesamiento de muestras en este medio. Se amplificó por qPCR el gen GAPDHde Bos taurus como control interno de extracción y para determinar la ausencia deinhibidores. Se amplificaron genes específicos de los patógenos por qPCR. Elprotocolo utilizado permitió obtener ADN en cantidad y calidad óptima pararealizar los estudios moleculares. Se detectó ADN de Leptospira spp. en el 12% delas muestras y de C. fetus en el 9%. No se detectó T. foetus, coincidente con loobtenido por cultivo, ni coinfecciones. Los resultados sugieren que la muestraderivada para diagnóstico de tricomoniasis bovina puede ser utilizada paradetectar, por biología molecular, patógenos asociados a infertilidad y/o abortos enrodeos de cría.