Fragmentación del ADN reducida en una población de espermatozoides seleccionados por la Progesterona, y su potencial uso en Medicina Reproductiva

Abstract

Introducción: recientemente, en nuestro laboratorio, hemos desarrollado un método denominado “ESE” (Ensayo de Selección Espermática; Patente en trámite), que selecciona y concentra los espermatozoides capacitados sobre la base del movimiento quimiotáctico hacia la progesterona. Por otra parte, la fragmentación del ADN espermático tiene una influencia negativa en el resultado de la fecundación asistida. Objetivo: evaluar el nivel de fragmentación del ADN en la población de espermatozoides seleccionada con el ESE. Metodología: la proporción de espermatozoides con el ADN fragmentado se evaluó mediante la técnica de “Comet Assay” en diferentes poblaciones espermáticas: antes de la capacitación, después de la selección con el “ESE” en presencia o ausencia de progesterona. Resultados y conclusiones: el porcentaje de espermatozoides con el ADN fragmentado antes de la capacitación fue del 27%±5%, valor que se elevó significativamente después de la capacitación espermática (62%±6%). Este valor se mantuvo constante en la población espermática que pasó por la cámara del ESE en ausencia de progesterona (60%±7%). Por el contrario, en presencia de progesterona, la proporción de espermatozoides con el ADN fragmentado se redujo significativamente a valores similares a los observados antes de la capacitación (32%±7%). Estos resultados sugieren que la selección espermática con el ESE en presencia de progesterona, no solo selecciona y concentra los espermatozoides capacitados, sino que también reduce significativamente la proporción de espermatozoides con el ADN fragmentado. El uso de esta población espermática podría mejorar significativamente el resultado de las técnicas de fecundación asistida, especialmente en la aplicación de ICSI.Introduction: Recently, we developed a method called “SSA” (Sperm Selection Assay; patent pending) to select and concentrate capacitated spermatozoa by means of the chemotactic orientation towards progesterone. On the other hand, sperm DNA fragmentation negatively affects assisted fertilization. Aim: To determine the level of DNA fragmentation in the sperm population selected by the SSA. Methodology: The proportion of spermatozoa showing DNA fragmentation was determined by means of the “Comet Assay” technique in different sperm populations: before capacitation, after capacitation and after SSA with or without progesterone. Results and conclusions: The percentage of spermatozoa with DNA fragmentation before capacitation was 27%±5%, value that was significantly increased after sperm capacitation (62%±6%). This parameter was not modified when spermatozoa passed through the SSA in the absence of progesterone. On the contrary, in the presence of this steroid, the SSA allowed to significantly reduce the percentage of spermatozoa with DNA fragmentation at the same extent observed previous to sperm capacitation (32%±7%). These results suggest that the sperm selection made with the SSA in the presence of progesterone not only selects and concentrates those capacitated spermatozoa but also reduces the percentage of spermatozoa with DNA fragmentation. The use of this sperm population may significantly improve the result of assisted reproduction techniques, especially in the cases where ICSI is applied.