Fisiología bioquímica digestiva y metabólica de crustáceos decápodos y peces teleósteos de interés regional, ecológico y/o económico: caracterización y modulación de enzimas clave en tracto digestivo

Abstract

El objetivo general de la presente tesis fue realizar estudios de caracterización y modulación de enzimas claves (en procesos digestivos y metabólicos y de modulación del contenido de reservas de energía) en el cangrejo eurihalino Neohelice granulata de la laguna costera Mar Chiquita y en el lenguado Paralichthys orbignyanus. La finalidad de estos estudios fue establecer el posible rol de enzimas clave en mecanismos de ajustes digestivos y/o metabólicos en relación a diferentes condiciones fisiológicas y/o ambientales cubriendo un área de vacancia en el estudio de la fisiología bioquímica, digestiva, integrativa y ambiental de estos organismos. Para cumplir con el objetivo general se plantearon los siguientes objetivos particulares: a) determinar la existencia y características bioquímicas de actividades de Na+-K+ ATPasa y Na+ ATPasa en hepatopáncreas de N. granulata (Capítulo 1); b) determinar la modulación de la actividad de Na+ ATPasa y de Na+-K+ ATPasa a diferentes tiempos luego de la ingesta de alimento en hepatopáncreas de N. granulata en diferentes condiciones de salinidad ambiental y el efecto in vitro de dopamina sobre ambas actividades (Capítulo 2); c) determinar la concentración de triglicéridos y proteínas y las actividades de lipasa, de fosfatasa alcalina (AP) sensible e insensible a levamisol en hepatopáncreas de machos adultos procedentes de planicie de marea y espartillar de la Laguna Costera Mar Chiquita a diferen tes tiempos luego de la exposición en laboratorio a las mismas condiciones de alimentación (Capítulo 3); d) determinar la actividad de carbohidrasas en intestino y glucógeno y glucosa libre en órganos de reserva en adultos del lenguado P. orbignyanus (Capítulo 4); e) determinar la actividad de proteasas y lipasa en intestino y concentración de proteínas y triglicéridos en órganos de reserva en adultos del lenguado P. orbignyanus (Capítulo 5) y f) caracterizar parcialmente la actividad de AP en intestino anterior de adultos del lenguado P. orbignyanus y la respuesta postingesta de la actividad de AP en intestino anterior de adultos y juveniles de P. orbignyanus (Capítulo 6). Los resultados de la presente tesis muestran la co-existencia de actividad de Na+-K+ ATPasa (bomba clásica de sodio) y de Na+ ATPasa insensible a ouabaína e inhibible por furosemida (segunda bomba de sodio) en hepatopáncreas de N. granulata. Las mismas fueron parcialmente caracterizadas. La estimulación por Na + bajo total inhibición de la actividad de Na+-K+ ATPasa reveló la existencia de actividad de Na + ATPasa la cual fue totalmente inhibida por furosemida 2 mM, exhibe cinética de Michaelis-Menten para ATP y actividad más alta alrededor de pH 7,4 (Capítulo 1). Se determinó la existencia de una modulación específica y diferencial de la actividad Na+ ATPasa luego de la ingesta de alimento en hepatopáncreas de N. granulata sugiriendo su rol en ajustes digestivos y metabólicos postprandiales y como componente de respuestas post-ingesta a nivel bioquímico a la salinidad ambiental (Capítulo 2). Se observó que en individuos de N. granulata de planicie de mareas y espartillar, la concentración de triglicéridos y las actividades de lipasa y de AP sensible a levamisol e insensible a levamisol en hepatopáncreas son afectadas diferencialmente por la exposición a una misma dieta (Capítulo 3). Se demostró la existencia de actividad de amilasa y de maltasa en intestino anterior de adultos de P. orbignyanus y de glucógeno en hígado y músculo (Capítulo 4), y la existencia de actividad de tripsina, N-aminopeptidasa (APN) y de lipasa en intestino anterior de adultos de P. orbignyanus (Capítulo 5). Los resultados muestran una respuesta diferencial de la actividad de amilasa, maltasa (Capítulo 4), tripsina, APN y lipasa (Capítulo 5) a diferentes tiempos luego de la ingesta de alimento en intestino anterior de adultos de P. orbignyanus y de reservas en hígado y músculo. Por último se observó la existencia de actividad de AP en intestino de adultos y juveniles de P. orbignyanus, la cual se caracterizó parcialmente en adultos. Dicha actividad presenta una respuesta diferente a distintos tiempos postingesta sugiriendo la existencia de ajustes postprandiales diferenciales en relación a la edad (Capítulo 6). Los resultados de la presente tesis constituyen un aporte de importancia al conocimiento sobre diferentes aspectos de la fisiología bioquímica digestiva y metabólica de crustáceos decápodos y peces teleósteos en general y de cangrejos eurihalinos estuariales y peces planos estuario-dependientes de importancia regional, ecológica y/o comercial, en particular. Además, son de impacto y potencial aplicación en acuicultura debido a la importancia para la misma del conocimiento del perfil digestivo y metabólico a nivel bioquímico (existencia y modulación de enzimas digestivas específicas y reservas de energía) para el mejoramiento del cultivo y explotación de especies de interés comercial.