Pseudomonas sp. P26 en presencia de dibenzotiofeno: cinética de remoción y caracterización celular

Abstract

El dibenzotiofeno (DBT) es un compuesto heterocíclico azufrado, poliaromático y derivado del petróleo, utilizado como modelo para el estudio de procesos de remoción microbiana de contaminantes orgánicos azufrados. La búsqueda de bacterias ambientales capaces de tolerar y remover este tipo de compuestos resulta relevante para el desarrollo de estrategias biotecnológicas aplicables a procesos de biorremediación y biodesulfuración. El objetivo de este trabajo fue evaluar la cinética de remoción de DBT por Pseudomonas sp. P26 y caracterizar aspectos celulares asociados al crecimiento en presencia del compuesto. Para ello, la cepa se cultivó en medio JPP suplementado con DBT 0,2 mM, a 30 °C y 180 rpm, durante 14 días. Se tomaron muestras a los días 0, 1, 3, 7 y 14 para determinar la concentración residual de DBT mediante HPLC y la viabilidad bacteriana por recuento de UFC/mL. Se incluyeron controles abióticos y cultivos sin DBT. Además, se analizaron cultivos de 7 días mediante microscopía electrónica de barrido y espectroscopía infrarroja con transformada de Fourier (FT-IR). La remoción de DBT en cultivos de Pseudomonas sp. P26 fue superior a la observada en los controles abióticos a partir del tercer día de incubación. La remoción biológica del compuesto alcanzó 50% luego de 14 días, observándose un incremento temprano, con 38% a los 3 días, sin diferencias significativas en los tiempos posteriores. La disminución de la concentración residual de DBT se ajustó a un modelo cinético de segundo orden, con un tiempo de vida media de 5,76 días en presencia de la cepa, aproximadamente diez veces menor que en los controles abióticos. Los recuentos de células viables de P26 disminuyeron marcadamente a partir del tercer día de incubación. Las observaciones microscópicas evidenciaron la formación de agregados celulares y abundantes conexiones célula-célula en presencia de DBT, compatibles con respuestas de adaptación al estrés ambiental. El análisis por FT-IR permitió identificar grupos funcionales asociados a proteínas, lípidos, polisacáridos, polifosfatos y carbohidratos, aunque no evidenció cambios marcados entre las condiciones evaluadas. Estos resultados indican que Pseudomonas sp. P26 presenta capacidad significativa para remover DBT en las condiciones ensayadas y constituye una cepa de interés para estudios posteriores orientados a optimizar procesos de biorremediación de matrices afectadas por contaminantes azufrados derivados del petróleo.