Participación de los genes citocromos P450 y del gen NADPH-citocromo P450 reductasa en la resistencia a insecticidas piretroides en el vector de la enfermedad de Chagas Triatoma infestans

Abstract

Los programas de control de la enfermedad de Chagas promueven la eliminación de las poblaciones del insecto vector Triatoma infestans mediante la fumigación con insecticidas piretroides. Sin embargo, se han observado fallas en el control debido a la existencia de resistencia a los insecticidas. Incrementos en la expresión de genes citocromos P450 son considerados responsables de aumentar el metabolismo de insecticidas y parece ser en un fenómeno común en el desarrollo de resistencia. Las reacciones de mono-oxigenación catalizadas por los citocromos P450 requieren de electrones provistos por la NADPH citocromo P450 reductasa (CPR). Dada la diversidad de funciones que tienen los citocromos P450 y que existen múltiples genes P450 en el genoma de insectos, la presencia en general de una única copia del gen CPR, resultó de interés como objeto de estudio para esclarecer el rol que tendrían los genes P450 en la resistencia a insecticidas piretroides en T. infestans. Para tal fin, se analizaron comparativamente los niveles de expresión del gen CPR de individuos de T. infestans pertenecientes a poblaciones susceptibles y resistentes a insecticidas piretroides. Además, se investigó el efecto del silenciamiento del gen CPR en una población resistente a insecticidas piretroides mediante la técnica de ARN de interferencia (ARNi). Las determinaciones de los niveles de expresión transcripcional del gen CPR se realizaron mediante la técnica de Retrotranscripción y PCR en Tiempo Real (RT-qPCR) a partir de ARN total extraído de cuerpo graso de ninfas V de T. infestans. El análisis de la expresión del gen CPR en individuos provenientes de las poblaciones susceptibles y resistentes reveló sobre-expresión del gen CPR en algunas poblaciones resistentes. Por otra parte, el silenciamiento del gen CPR en una población de T. infestans resistente a insecticidas piretroides que presenta sobre-expresión del gen CPR, mostró una disminución significativa en la expresión del gen de aproximadamente diez veces en el grupo de insectos que fueron inyectados con el ARNi respecto a los grupos control y evidenció en ese grupo un incremento significativo en la susceptibilidad a deltametrina. Estos resultados refuerzan la hipótesis de que el proceso de desintoxicación metabólica mediado por citocromos P450 constituye un factor fundamental en la resistencia a insecticidas piretroides observada en T. infestans.