Identificación molecular de subtipos DE VTEC O157:H7 aislados de reservorios, alimentos y casos clínicos

Abstract

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) O157:H7 es el serotipo mayormente involucrado en los casos de enfermedad en el mundo, y en Argentina, también el más frecuentemente asociado al síndrome urémico hemolítico (SUH). Sin embargo, no todos los aislamientos de O157:H7 tienen la misma capacidad de infectar y de causar enfermedad. Desde el Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología de la Facultad de Cs. Veterinarias (UNCPBA) hemos planteado como uno de nuestros objetivos caracterizar la diversidad genética de VTEC O157:H7 de distintos orígenes, e identificar subtipos asociados a patogenicidad y virulencia. Para ello, se emplean distintos métodos de subtipificación molecular y se analiza la presencia de genes relacionados con virulencia. En un estudio, caracterizamos 43 aislamientos VTEC O157:H7 obtenidos de ganado bovino, seres humanos y alimentos de la región pampeana de Argentina. El 98 % de ellos pertenecieron al linaje I/II. El 100 % presentó el alelo del SNP (8_rhsA) relacionado al clado 8, uno de los identificados como más virulentos. Un alto porcentaje de aislamientos presentó en alelo tir 255 T>A T, asociado también a hipervirulencia, y fue asignado al filogrupo E. Según el MLVA se encontró una amplia diversidad genética. Demostramos que las cepas de la región pampeana de Argentina son un grupo filogenéticamente homogéneo que presenta diversidad genética en relación a sus perfiles MLVA y de genes nle (efectores no codificados en LEE). La pertenencia de los aislamientos al clado hipervirulento 8 y al linaje I/II, la alta prevalencia del alelo tir 255 T>A T y de genes de factores putativos de virulencia, permitió asignar a la mayoría de las cepas O157:H7 de esta región un alto riesgo para la salud pública y explican, en parte, por qué Argentina es el país con la incidencia más alta de SUH en el mundo. En otro trabajo, comparamos la diversidad genética de 76 cepas VTEC O157:H7 aisladas de casos de SUH de Argentina y Chile. Nuevamente observamos la circulación casi exclusiva de aislamientos pertenecientes al linaje I/II, asociado a cepas hipervirulentas, y al filogrupo E. Se han postulado una serie de características relacionadas con la alta incidencia o gravedad de las infecciones por VTEC O157, como la pertenencia al linaje I/II y la presencia del supuesto factor de virulencia ECSP_3286. Sin embargo, estos no fueron suficientes para diferenciar las cepas argentinas y chilenas en este estudio. El único marcador que se distribuyó de manera significativamente diferente fue ECSP_2687, el cual codifica una proteína que reduce la expresión de citoquinas. Los métodos de subtipificación molecular nos permitieron ampliar el conocimiento sobre la estructura poblacional e identificar características de virulencia presentes en las cepas estudiadas, generando datos útiles para la evolución de este grupo.