Evaluación De La Actividad Antitumoral De Un Extracto Acuoso Obtenido A Partir De Hojas De Calden En Células De Cancer De Mama Triple-Negativas

Abstract

El potencial medicinal de diferentes especies pertenecientes al género Neltuma ha comenza- do a estudiarse desde hace unos años. Neltuma caldenia (Nc), es una especie arbórea nativa de Argentina, comúnmente conocida como «Caldén», cuyas propiedades antitumorales aún no han sido exploradas. Por otro lado, es sabido que el Cáncer de Mama Triple Negativo (CMTN) es un subtipo tumoral muy agresivo con limitadas estrategias terapéuticas en comparación con los otros subtipos de CM. El objetivo de este trabajo es investigar la actividad antitumoral de un extracto acuoso obtenido de hojas de caldén (EANc) en células de CMTN. Para ello, se utilizaron células de CMTN (murinas: 4T1 y humanas: MDA-MB-231) y una línea celular ma- maria no-maligna (murina: HC11). En primera instancia, las células se trataron con un rango de concentraciones de EANc (0,001- 0,01- 0,1- 1,0- 2,5 mg/ml) o vehículo durante 48 o 72 horas y se determinó la viabilidad celular mediante ensayos colorimétricos de violeta de cristal y MTT. Luego, para investigar los mecanismos celulares responsables de la acción antitumoral del EANc, se analizó el ciclo celular y la apoptosis mediante citometría de flujo con marcación de Ioduro de Propidio (IP) y Anexina V + IP, respectivamente. Asimismo, el efecto del EANc sobre la migración celular se evaluó mediante ensayos de cierre de la herida. Los análisis es- tadísticos se realizaron con el programa GraphPad Prism. Los resultados demuestran que el EANc redujo la viabilidad de las células 4T1 y MDA-MB-231 de una manera concentración-de- pendiente. Además, el EANc provocó un efecto sobre la viabilidad menor en las células HC11 en comparación con las tumorales; no se detectó ningún efecto a 0,001, 0,01 y 1 mg/ml luego de 48 y 72 horas de tratamiento (p>0,05).El análisis del ciclo celular de las células 4T1 y MDA- MB-231 tratadas con EANc a 1 mg/ml durante 48 horas demostró que provoca un arresto de células en fase S en comparación con las células tratadas con el vehículo (p<0,001). A conti- nuación, a 72 horas de tratamiento, el EANc presenta efectos apoptóticos en las células MDA- MB-231 (p<0,01). En cuanto a la migración celular, el EANc redujo la capacidad migratoria de las líneas celulares 4T1 (0,1 mg/ml; p<0,001) y MDA-MB-231 (1 mg/ml; p<0,001), mientras que obtenidos sugieren la actividad antitumoral del EANc en células de CMTN y su acción diferen- cial entre células tumorales y no- malignas. Actualmente, se están realizando estudios para dilucidar la composición fitoquímica completa del EANc y su toxicidad en ratones no afectó a la migración de las células HC11 (0,1 mg/ml; p>0,05). En conjunto, los resultados