Evaluación de los efectos de distintos métodos tradicionales de limpieza de material esqueletario mediante microscopía electrónica de barrido

Abstract

Las colecciones biológicas constituyen depósitos únicos de biodiversidad, existiendo escasos protocolos de preparación que aseguren mínimo deterioro a largo plazo. Nuestro objetivo fue evaluar los efectos de diferentes técnicas de preparación de material esqueletario sobre la superficie ósea. Materiales y Métodos: Se ensayaron 11 tratamientos de limpieza de fémures de ratas Wistar, consistentes en enterramiento (2 meses) y combinaciones de agentes químicos (enzimas, EZ; hidróxido de potasio, KOH), temperaturas y tiempos de exposición: EZ-10%-25°C-70h; EZ-10%-70°C-2h; EZ-15%-25°C-70h; EZ-15%-70°C-2h; KOH-5%-25°C-1h; KOH-5%-25°C-2h; KOH-5%-40°C-1h; KOH-5%-40°C-2h; KOH-5%-40°C-4h; KOH-10%-40°C-2h. Sobre imágenes de los huesos limpios, obtenidas por microscopía electrónica de barrido, se evaluó la integridad ósea y el porcentaje de superficie cubierta por tejidos blandos. Resultados: Los mejores resultados en cuanto a remoción de partes blandas se obtuvieron mediante enterramiento (100% de superficie ósea limpia), y con los tratamientos KOH-10%-40°C-2h y KOH-5%-40°C-4h (96 y 95%, respectivamente); sin embargo, en todos ellos se observó descamación superficial, grietas y porosidad. Las demás combinaciones de KOH rindieron una limpieza inferior (20-81%), con menor deterioro en superficie. En los tratamientos enzimáticos, la integridad ósea fue mayor pero la remoción lograda fue menor, observándose una fuerte relación con la temperatura (tratamientos a 70°C: 69-80% de hueso limpio; tratamientos a 25°C:16-30%).Discusión: Los tratamientos testeados en este trabajo son frecuentemente utilizados en las colecciones científicas. El éxito obtenido, en términos de limpieza y conservación de la superficie ósea, no fue homogéneo. Los daños causados por enterramiento y KOH sobre la superficie ósea coincidieron con lo observado por otros autores, aunque los tratamientos enzimáticos dejaron mayor cantidad de tejido que el reportado. Conclusiones: Nuestros resultados revelan consideraciones a tener en cuenta para obtener huesos limpios preservando su superficie. Se deberían analizar más combinaciones que permitan maximizar la limpieza del material minimizando su daño.