Efectos opuestos de acetato de medroxiprogesterona (MPA) a nivel vascular y óseo

Abstract

Las enfermedades cardiovasculares y óseas son entidades clínicas multifactoriales que frecuentemente coexisten en mujeres posmenopáusicas. Estudios clínicos y epidemiológicos han demostrado una relación relevante entre un alto recambio óseo y la calcificación vascular (CaV). Entre los mecanismos implicados en la CaV se encuentra el deterioro de la función endotelial y la transdiferenciación osteogénica de células musculares lisas vasculares (CMLV) con mineralización de la matriz extracelular, inducida por el microambiente inflamatorio. Si bien la terapia de reemplazo hormonal (TRH) surgió como opción terapéutica para aliviar síntomas y prevenir patologías asociadas a la menopausia, los resultados de estudios clínicos plantearon serias controversias respecto al riesgo/beneficio de la misma. La TRH combina estrógenos con progestágenos sintéticos como MPA. En virtud del debate planteado, nos propusimos investigar la acción vascular y ósea de MPA, focalizándonos en la CaV y en la osteoblastogénesis respectivamente. Como sistema experimental se emplearon cultivos primarios de células endoteliales (CE), CMLV y preosteoblastos aislados a partir de ratas hembras Wistar jóvenes. Para promover la transdiferenciación osteogénica, las CMLV se cultivaron durante 21 días en DMEM suplementado con β-glicerofosfato 10 mM y CaCl2 4 mM (CMLV-OB). Se realizaron tratamientos in vitro con MPA 1-100 nM. El grupo control recibió vehículo solamente (isopropanol 0,01%). Como marcadores de diferenciación osteoblástica se determinó el contenido de calcio en matriz extracelular (método colorimétrico), la actividad de fosfatasa alcalina (FAL) y la formación de nódulos de calcificación (tinción con rojo de alizarina). Las CMLV-OB mostraron un elevado nivel de actividad FAL y de mineralización extracelular. El tratamiento con MPA (1 nM, 21 días) redujo significativamente la actividad enzimática (236,3 ± 19.8 vs. 158.4 ± 17.6 x103 UI/mg de proteína, control vs. MPA, p<0.02), el contenido de calcio en matriz (355.3 ± 36.8 vs. 247.5 ± 19.7 µg/mg de proteína, control vs. MPA, p<0.02) y la formación de núcleos de calcificación (0.23 ± 0.0207 vs. 0.095 ± 0.0167 unidades de absorbancia, control vs. MPA, p<0.02). El mecanismo de acción de MPA implica la participación del receptor de Pg (PgR), ya que el pretratamiento de las células con el compuesto RU486, antagonista del PgR, revirtió completamente la acción de la progestina. Se descartó la participación del receptor de andrógenos (AR), ya que en presencia de flutamide, un antagonista del AR, el efecto del progestágeno se sostiene. La progestina favorece la reendotelización vascular. En CE, el tratamiento con MPA 1 nM estimuló la migración celular permitiendo el cierre de la herida provocada sobre la monocapa celular (395% vs. control, p<0.001, 96 h). Estos efectos se detectaron también en cultivos de CE provenientes de animales hipoestrogénicos (seniles o bilateralmente ovariectomizados). A nivel óseo, 15 días de tratamiento con MPA 1 nM indujo diferenciación osteoblástica. La progestina incrementó marcadamente la actividad FAL, la mineralización, y la secreción del factor paracrino VEGF (84%, 21% y 42%, vs. control respectivamente, p<0.02) a través de un mecanismo que involucra la participación del PgR. Los resultados muestran que MPA exhibe acciones opuestas, aunque potencialmente beneficiosas, a nivel vascular y óseo. Un efecto anti-osteogénico inhibiendo la CaV, y pro- osteogénico induciendo la osteoblastogénesis.