Hes, ¿representa aportes en el diagnóstico de Escherichia coli productora de toxina shiga?

Abstract

El mecanismo de colonización de todas las cepas de Escherichia coli productoras de toxina Shiga (STEC) no está dilucidado. Se ha descripto una isla de patogenicidad, Locus de adherencia y autoagregación (LAA), que codifica genes (como el gen hes) que participan en la adhesión y autoagregación. hes fue detectado en STEC aisladas de casos de enfermedad. El objetivo fue estudiar en Escherichia coli HB101pVB1_hes, la capacidad de adherencia y formación de biofilm, la expresión de hes en distintas condiciones y la neutralización de la adherencia celular con sueros bovinos. Se utilizó como control a Escherichia coli HB101. La adherencia celular en líneas HEp-2, se evaluó mediante el recuento de UFC. Para estudiar la neutralización por los sueros bovinos, se agregó 100μl de suero a pocillos que contenían cada cepa y se evaluó la cantidad de bacterias adheridas. El ensayo de biofilm se realizó en placas de poliestireno de 96 pocillos. Se analizó mediante qPCR la expresión de hes en la adherencia celular entre cepas adheridas - no adheridas, y antes - después de formar biofilm Escherichia coli HB101pVB1_hes mostró un incremento de adherencia a HEp-2 y una fuerte formación de biofilm comparada con Escherichia coli HB101 (p=<0.05). Los niveles de expresión de hes fueron más altos en las cepas adheridas que en las no adheridas y en la formación de biofilm. Se observó que el suero bovino mostró alta capacidad para neutralizar a hes (p= <0.05). Esto confirma la participación de Hes en adherencia y autoagregación. La seroneutralización demuestra que el bovino tiene anticuerpos contra Hes, que impiden la adherencia a HEp-2, indicando que Hes tiene funciones en la unión al epitelio bovino. hes podría ser utilizado como un marcador de cepas LEE-negativas y sumarse al esquema de detección para el diagnóstico.