Participación de dinamina y la caveolina en el proceso de entrada de virus enzoóticos del Complejo de Encefalitis Equina Venezolana.

Abstract

Los Arbovirus representan un grupo de patógenos de importancia médica-veterinaria a nivel mundial, en particular, aquellos transmitidos por mosquitos. El género Alphavirus incluye a los virus del complejo Encefalitis Equina Venezolana (VEE), de gran relevancia ya que causan encefalitis en los seres humanos y otros mamíferos. Se demostró la circulación de múltiples subtipos enzoóticos en nuestro país, lo que podría provocar la emergencia de variedades epizoóticas/epidémicas, manifestando la necesidad de profundizar en el estudio de su biología y patogénesis, en particular el ciclo de infección viral. El primer paso de la infección consiste en la unión de la partícula viral a receptores que se encuentran en la membrana celular, esto promueve la internalización del virus por diferentes mecanismos, entre ellos, la fusión directa con la membrana celular o diferentes vías endocíticas. Dentro de estas últimas, se encuentra la endocitosis mediada por clatrina o vías independientes de la clatrina y sensibles a la presencia de colesterol como la endocitosis mediada por caveolina y la macropinocitosis. Es por ello, que en este proyecto nos proponemos estudiar los mecanismos y moléculas involucrados en la internalización viral, desnudamiento y tráfico intracelular de subtipos enzoóticos del complejo de VEE, el virus Pixuna (PIXV) y el virus Rio Negro (RNV). Teniendo en cuenta los resultados obtenidos previamente, los cuales sugieren que la infección del PIXV y el RNV en células Vero depende, en parte, de la endocitosis mediada por clatrina, estudiaremos otros mecanismos de entrada, enfatizando en las diferentes vías y moléculas involucradas en la endocitosis dependiente de caveolina/balsas lipídicas y la macropinocitosis, en esta última haciendo énfasis, en la participación del citoesqueleto de actina y en las vías de señalización. Además, estudiaremos los compartimentos endocíticos implicados en el ciclo de infección viral y en cuál de ellos ocurre la liberación del genoma viral y, por último, la participación de los motores moleculares en la infección del PIXV y RNV. Para ello, emplearemos diversas estrategias de perturbación de la endocitosis celular y técnicas, incluyendo el tratamiento con inhibidores químicos y la expresión de proteínas dominantes negativas y constitutivas activas. Los resultados de las investigaciones a obtenerse mediante la utilización del PIXV y del RNV, serán extrapolables con otras cepas enzoóticas que causan enfermedad febril y que generalmente se confunden con dengue, como las producidas por los subtipos ID y IE y cepas epizoóticas (IAB y IC). Consideramos que para buscar vías de prevención y tratamiento de infecciones causadas por los miembros del complejo VEE se necesita un mejor entendimiento de los mecanismos moleculares de su ciclo replicativo y patogénesis. Actualmente no se dispone de vacunas ni de terapias antivirales y en este campo una estrategia interesante es el bloqueo de los pasos iniciales del ciclo viral.