Regulación dinámica de la respuesta inmune innata en cultivos primarios de células endometriales bovinas frente a estímulos virales y bacteriano

Abstract

La interacción entre señales bacterianas y virales en el microambiente uterino bovino constituye un eje crítico de regulación inmune local. La cepa 10-154 (genotipo 2) de gammaherpesvirus bovino tipo 4 (BoGHV-4) presenta divergencias genómicas respecto al genotipo 1, lo que sugiere posibles diferencias en la interacción virus–célula y en la modulación de la respuesta inmune en este modelo in vitro. En este estudio se evaluó la regulación temporal de mediadores clave de la respuesta inmune innata en cultivos primarios de células endometriales bovinas (CEB) frente a estímulos viral y bacteriano. Para ello, Se compararon tres condiciones experimentales en CEB: control, infección con BoGHV-4 10-154 (MOI 0,5) (V) y con exposición a lipopolisacárido (LPS) (V+LPS). El ARN total se extrajo a las 4, 12, 24 y 48 h y se cuantificó por RT-qPCR la expresión relativa de TLR4, IE2, CXCL-8, TNF-α e IFN-γ. La expresión de TLR4 fue significativamente inducida por LPS en todos los tiempos evaluados (p < 0,05), mientras que en presencia de BoGHV-4 (V y V+LPS) no se observó expresión, indicando que el virus estaría modulando negativamente la expresión del receptor. La expresión del gen viral IE2 presentó un aumento significativo (p < 0,05) a las 4 hs en V+LPS, mientras que a las 24 h los niveles fueron significativamente mayores en V en comparación con V+LPS (p < 0,05), evidenciando una posible regulación dependiente del contexto inflamatorio. En cuanto a los mediadores proinflamatorios, CXCL-8 aumentó significativamente en V+LPS a las 4 h (p < 0,05), con un perfil transitorio que retornó luego a niveles basales. En cambio, TNF-α mostró una respuesta dependiente del estímulo, con incremento tardío significativo en V (p < 0,05), indicando una cinética inflamatoria diferencial según el tratamiento. IFN-γ presentó un incremento progresivo en V, alcanzando su máxima expresión a las 48 h. Esta inducción tardía podría constituir un mecanismo regulador que limite la expresión de IE2 en fases posteriores de la infección. La menor magnitud de IFN-γ bajo coestimulación con LPS sugiere que el microambiente inflamatorio modula la intensidad del control antiviral. Estos hallazgos aportan evidencia sobre la interacción dinámica entre señales inflamatorias y antivirales en un modelo endometrial bovino in vitro, en concordancia con mecanismos descritos para gammaherpesvirus, donde mediadores inflamatorios pueden promover la activación viral temprana mediante vías dependientes de NF-κB.