Validación de PIN1 como blanco molecular para el tratamiento de glioblastoma mediante estrategias basadas en CRISPR-Cas9

Abstract

Pin1 es la única enzima descripta con la capacidad de reconocer y catalizar la isomerización de prolinas de motivos Ser/Thr-pro fosforilados, brindándole la capacidad de regular múltiples funciones celulares. Se ha observado en diversos tipos de cáncer, entre ellos glioblastoma, la sobreexpresión de pin1, vinculado a la participación de esta enzima en diversas vías oncogénicas. El glioblastoma se caracteriza por ser una enfermedad compleja y letal con recursos terapéuticos limitados. De esta necesidad de desarrollar nuevas terapias, surge el interés de explorar el rol de Pin1 en esta indicación. Sin embargo, pocos estudios se han realizado sobre la contribución de esta proteína en glioblastoma. Por estos motivos, en este trabajo nos propusimos desarrollar un modelo celular de glioblastoma pin1 KnockOut utilizando tecnología CRISPR/Cas9 con el objetivo de validar a Pin1 como blanco molecular en glioblastoma. Este modelo fue generado con éxito y resulta una herramienta importante tanto para el estudio de esta enfermedad como para el estudio de Pin1. Se estudió el comportamiento del modelo en diversos procesos celulares donde observamos que las células pin1 KnockOut disminuyeron de forma significativa su capacidad migratoria, como también su actividad telomerasa. Por otro lado, estas células mostraron un aumento en el tiempo de duplicación como una menor respuesta al estímulo proliferativo y consecuentemente un mayor arresto de las células en fase G0-G1 del ciclo celular. Todos estos resultados confirman la contribución de Pin1 en diversos procesos celulares vinculados a la tumorigénesis, validando esta proteína como un blanco molecular atractivo para el desarrollo de terapias novedosas para el tratamiento de glioblastoma.