Comportamiento de cepas argentinas del herpesvirus bovino 4 (BoHV-4) genéticamente divergentes en una infección experimental en terneros

Abstract

El herpes virus bovino 4 (BoHV4) está relacionado a diversas presentaciones clínicas en bovinos. Particularmente se lo asocia con infecciones del tracto reproductivo durante el posparto; asimismo ha sido aislado de animales aparentemente sanos, pudiendo infectar diferentes especies tanto in vivo como in vitro, incluyendo líneas celulares de origen humano. Los resultados de infecciones experimentales en bovinos y en otras especies no rumiantes, han demostrado que el BoHV4 puede infectar células de diferentes tejidos y establecer latencia en linfocitos1, 2. A partir de sus primeros aislamientos se consideraron dos prototipos: el americano (tipo DN599) y el europeo (tipo Movar). En Argentina, el BoHV-4 se aisló y caracterizó en el año 2007 a partir de muestras de mucus cérvico-vaginal (MCV) de vacas que presentaron cuadros de aborto, obteniéndose hasta el momento más de 50 aislamientos. Las cepas caracterizadas se clasificaron en tres grupos filogenéticos diferentes, designados como genotipos 1, 2 y 3. El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad de infección, la distribución en el organismo y la producción de alteraciones patológicas de tres cepas filogenéticamentediferentes en terneros infectados experimentalmente. Estas cepas se aislaron en el Servicio de Diagnóstico Veterinario del INTA Balcarce, de MCV de vacas que abortaron. Los animales se inocularon intranasalmente con 20 ml (10 ml en cada orificio nasal) de sobrenadante librede células de las cepas virales, previamente amplificadas en cultivos de Madin-Darbybovine kidney, con un título de 106 TCID50/ml: ternero 1(t1) cepa 09/508 (genotipo 1), ternero2 (t2) cepa 08/330 (genotipo 2), ternero 3 (t3) cepa 07/435 (genotipo 3) y ternero 4 (t4) con MEM como control negativo. Se recolectaron muestras de secreciones oculares y nasales, suero y linfocitos los días 0, 7, 14 y 21 pos infección (pi),y muestras de órganos luego de la eutanasia el día 21. El genoma viral de lastres cepas fue detectado, mediante nested PCR para el ORF 253, en médula, nódulotrigeminal y cerebro del t1, en bazo, riñón, linfonódulo retro faríngeo y cerebro del t2 y en linfo nódulo pulmonar y cerebro del t3. También se detectó el genoma de las cepas 330 (días 14 y 21 pi) y 508 (día 21 pi) en linfocitos. Elvirus fue aislado de los hisopados nasales de los días 7 y 14 pi para las cepas330 y 435, y del día 14 pi para la cepa 508. El genoma viral no se detectó en las muestras del ternerocontrol. No se observaron manifestaciones clínicas en ninguno de los animales. Enel análisis microscópico se observó una leve respuesta inflamatoria mononuclearen la submucosa traqueal y en la cápsula del linfo nódulo retro faríngeo, y gliosisleve en ganglio trigémino en el t1. En el t3 se observó leve respuesta inflamatoria en el tejido conectivo capsular del linfo nódulo pulmonar. Además, se determinó la presencia de neuronas hipercromáticas en la región dorsal del lóbulo frontal y leve satelitosis en la porción del lóbulo piriforme. Estos resultados demuestran que estas cepas del BoHV4 tienen la capacidad dediseminarse en el organismo infectando diferentes tejidos. Si bien no se observaron manifestaciones clínicas en los animales inoculados este trabajo permitió comprobar que estas cepas argentinas de BoHV4 tienen la potencialidad de infectar células del sistema nervioso a diferencia de otras cepas utilizadas en ensayos experimentales previos.