Expresión diferencial de las citoquinas TNF-α e IFN-γ en células somáticas de la leche y en células mononucleares de sangre periférica de bovinos Holando Argentino infectados con el virus de la leucosis bovina

Abstract

Introducción y objetivos: El virus de la leucosis bovina (BLV) es un retrovirus que afecta a los bovinos principalmente de raza lechera. La prevalencia predial e individual de la infección por BLV en Argentina es mayor al 90%, teniendo un gran impacto económico por pérdidas directas e indirectas en la industria láctea. Se ha reportado que el BLV tiene capacidad de alterar la respuesta inmunológica del bovino a nivel sistémico, disminuyendo los niveles de expresión de citoquinas que cumplen funciones de prevenir la progresión de la enfermedad, como es el IFN-γ característico de la respuesta tipo Th1, y aumentando la expresión de TNF-α, la cual tiene actividades de modulación de la apoptosis y proliferación celular. Hasta el momento no existen estudios que evalúen la modulación de estas citoquinas a nivel de células somáticas de la glándula mamaria bovina. Con base a lo anterior, el objetivo de este trabajo fue detectar el BLV en células somáticas (SC) separadas de la leche y en células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de bovinos Holando Argentino, y comparar el nivel de expresión de TNF-α e IFN-γ en ambos tipos celulares. Materiales y métodos: Se separaron las SC de la leche y las PBMC de sangre entera, a partir de muestras de 22 bovinos Holando Argentino provenientes de un establecimiento lechero con alta prevalencia de infección de BLV ubicado en el Partido de Tandil, Buenos Aires. La detección viral se realizó por PCR convencional amplificando un segmento del gen pol viral y se determinó la carga proviral por PCR en tiempo real (qPCR) mediante cuantificación absoluta. El nivel de expresión de ARNm de TNF-α e IFN-γ se realizó mediante qPCR (cuantificación relativa, respecto al gen endógeno GAPDH). Resultados: Se detectó la presencia del BLV en SC y PBMC de los 22 bovinos evaluados. En todos los animales, se encontró menor expresión de TNF-α y mayor expresión de IFN-γ en SC, comparada con la expresión de ambas citoquinas en PBMC. Aunque las diferencias no fueron significativas, dicha expresión de citoquinas se asocia a una baja carga proviral en glándula mamaria y alta carga proviral a nivel sistémico. Conclusiones: Este trabajo constituye el primer estudio en comparar la expresión de TNF-α e IFN-γ en células sanguíneas y de glándula mamaria en los animales infectados con el BLV, revelando que pueden presentar diferencias en la respuesta celular entre ambos compartimentos celulares, siendo más eficiente en la ubre. Un mejor entendimiento de esta respuesta celular puede contribuir al diseño de estrategias de control de la infección viral.