Generación de una colonia de ratones transgénicos homocigotas K18-hACE2 para la evaluación de candidatos vacunales y terapéuticos contra el SARS-CoV-2

Abstract

EL SARS-CoV-2 es el agente etiológico responsable de la enfermedad COVID-19 que inició una pandemia desde finales de 2019. Existen distintos modelos animales para esta enfermedad siendo el modelo de ratón transgénico K18-hACE2, originalmente desarrollado para el estudio del SARS CoV-1, de gran relevancia en el contexto actual. Considerando que los ratones se comercializan como hemicigotas y dada la ausencia de ratones homocigotas para el transgén K18-hACE2, el objetivo de este trabajo fue generar una colonia de ratones homocigotas K18-hACE2-Tg/Tg bajo condiciones ambientales controladas. Para la F1 se utilizaron 10 ratones hemicigotas (7 hembras y 3 machos), de 6-8 semanas de edad, provenientes de The Jackson Laboratory (USA). De la F1 se identificaron mediante genotipificación por PCR 78 animales: 62 hemicigotas (Tg/0) y 16 salvajes (0/0). Aquellos animales identificados como transgénicos se cruzaron con ratones C57BL/6J para seleccionar los parentales homocigotas que generaron 100% de hemicigotas en la F2. De 224 crías analizadas, se obtuvieron 7 parentales homocigotas K18-hACE2-Tg/Tg que fueron utilizados para la colonia fundación de ratones homocigotas K18-hACE2-Tg/Tg. El modelo de ratón homocigota K18 hACE2-Tg/Tg desarrollado en este trabajo podrá ser empleado para el estudio de la patogénesis de la enfermedad y la evaluación de posibles terapéuticos contra el SARS-CoV-2.SARS-CoV-2 is the causative etiological agent of the COVID-19 disease that started a pandemic in late 2019. Among different animal models for this disease, the K8-hACE2 transgenic mouse model, originally developed for the study of SARS-CoV-1, proved to be of great relevance in the current context. Considering that those mice are marketed as hemizygous and given that homozygous mice for the K18-hACE2 transgene are not commercially available, this work aimed to describe the creation of a colony of homozygous K18-hACE2-Tg/Tg mice under controlled environmental conditions. For the F1 progeny 10 hemizygous mice (7 females and 3 males), between 6-8 weeks of age, from The Jackson Laboratory (USA) were used. From the F1, 78 animals were identified by PCR genotyping: 62 hemizygous (Tg/0) and 16 wild types (0/0). Those animals identified as transgenic were crossed with C57BL/6J mice to select the homozygous parents that generated 100% hemizygous in F2. From a total of 224 analyzed offspring, 7 homozygous K18-hACE2-Tg/Tg parents were obtained, which were used for the foundation colony of homozygous K18-hACE2-Tg/Tg mice. The homozygous K18-hACE2-Tg/Tg mouse colony developed in this work will be able to use for the study of pathogenesis and the evaluation of possible therapeutics against SARS-CoV-2.