Caracterización del n-glicoma sérico como potencial fuente de biomarcadores para pronóstico de pacientes con enfermedad de Chagas crónico

Abstract

La Enfermedad de Chagas, conocida también como tripanosomiasis americana, es una enfermedad causada por el parásito hemoflagelado Trypanosoma cruzi y actualmente, se estima que entre 6 y 7 millones de personas en todo el mundo están infectadas. La infección crónica de Chagas puede manifestarse como asintomática, constituyendo el 70% de los casos, o desarrollar sintomatología cardíaca, digestiva o mixta en el 30% de los pacientes que padecen esta enfermedad. Tanto la persistencia del parásito en reservorios tisulares como la respuesta inmune generada, han sido asociadas al desarrollo de las manifestaciones crónicas. En este contexto, la ausencia de biomarcadores de prognosis adecuados dificulta, por parte del personal médico, la toma de decisiones clínicas adecuadas para mejorar la calidad de vida de los pacientes. La alteracion especifica del N-glicoma sérico se ha asociado a varias patologías, lo cual derivó en la proposición de estructuras glicosídicas o glicoproteínas como biomarcadores tanto para enfermedades inflamatorias crónicas (ej, enfermedades inflamatorias intestinales) como para infecciosas (ej, HIV y Leishmaniasis). Tomando en cuenta estos antecedentes, y considerando: a) el alto grado de inflamación observado durante el desarrollo de la cardiopatía chagásica y b) el importante papel de la glicobiología en la supervivencia de T. cruzi, decidimos estudiar si las proteínas N-glicosiladas del suero podrían ser utilizadas como marcador de prognosis en pacientes chagásicos. Para ello, se realizó la eliminación enzimática de N-glicanos a partir de muestras de sueros de pacientes asintomáticos, con cardiopatía e individuos no infectados (n=8 por grupo). Los N-glicanos así tratados fueron analizados por cromatografía líquida incluyendo intercambio aniónico (WAX-HPLC), que permite establecer el porcentaje de glicanos cargados negativamente, y de interacción hidrofílica (HILIC-UPLC), que permite la caracterización detallada de las estructuras N-glicosídicas. Los experimentos realizados demostraron diferencias entre las tres cohortes: mientras los individuos con cardiopatía muestran un aumento en trisialilados tanto por WAX como por HILIC (estructuras A3G3S3, FA3G3S3 y finalmente, A4G4S3), los individuos no infectados difieren respecto de los sujetos infectados a nivel del perfil de tetrasialilados. Estos resultados muestran cambios en el N-glicoma sérico que podrían presentar potencial como marcadores de prognosis en la Enfermedad de Chagas.