Nueva prueba diagnóstica para autoanticuerpos en Miastenia Gravis basado en un sistema de micropartículas fluorescentes libre de células

Abstract

Introducción: Se ha desarrollado una novedosa prueba diagnóstica para la detección de autoanticuerpos en pacientes con miastenia gravis. Este nuevo método, libre de células, es relativamente simple y consume menos tiempo y materiales que el radioinmunoensayo estándar, método de referencia utilizado actualmente en la clínica. Métodos: La prueba consiste en el uso de micropartículas de poliestireno recubiertas con el receptor de acetilcolina (se probaron dos fuentes de receptor de diferente origen), marcación específica del receptor con ligandos fluorescentes de alta afinidad (α-bungarotoxina-AlexaFluor o anticuerpos anti-receptor policlonales provenientes de los sueros de pacientes diagnosticados con la enfermedad, seguidos de anticuerpos secundarios conjugados con fluorocromos), y detección por citometría de flujo. Resultados: Valores de intensidad de fluorescencia media para sueros positivos (A a E) por la técnica de referencia versus un pool de sueros humanos normales: C, D, E (p<0.001) A, B (p<0.05) para una fuente de receptor y: A, C, D (p<0.001) E (p<0.01) B (p<0.05) para la otra fuente de receptor evaluada.Conclusión: Las dos estrategias diferentes evaluadas fueron exitosas para la detección de autoanticuerpos en el suero de pacientes con miastenia gravis. Adicionalmente esta prueba tiene el potencial para distinguir entre las distintas formas de los anticuerpos anti-receptor de acetilcolina, y los resultados podrían correlacionarse con la severidad de la miastenia gravis, pudiendo resultar un elemento predictivo de gran utilidad en el seguimiento de la evolución clínica de la enfermedad.