Perfil bioquímico en vesículas extracelulares de células tiroideas tumorales y no tumorales co-cultivadas con fibroblastos: Impacto en la captación celular

Abstract

Las vesículas extracelulares (VEs) median la comunicación célula-célula, modulando elmicroambiente e influyendo en la progresión tumoral. Estudios previos mostraron que la interacciónentre células tumorales tiroideas y fibroblastos (Fb) genera VEs con un perfil proteómico asociado a ladegradación de matriz extracelular, favoreciendo la síntesis y actividad de metaloproteinasa 2 (MMP2)en células tiroideas no tumorales.En este trabajo se exploraron las características bioquímicas de las VEs secretadas y su impacto en lacaptación celular mediante microscopía Raman (m-Raman) y citometría de flujo (CF). Célulastumorales tiroideas (TPC-1) y no tumorales (NThyOri) fueron co-cultivadas con Fb normales,simulando el microambiente tumoral. Las VEs obtenidas por ultracentrifugación de los sobrenadantesde cultivos de células aisladas y co-cultivadas fueron caracterizadas por m-Raman y sus perfilesespectrales comparados para identificar patrones bioquímicos específicos. La captación de VEs porcélulas NThyOri fue evaluada mediante CF. Los espectros de las VEs derivadas de células TPC-1indicaron enriquecimiento en proteínas respecto a los de VEs de NThyOri. Estos, presentaron unpredominio de señales de lípidos, saturados e insaturados, sugiriendo mayor fluidez de membrana enVEs de NThyOri. El co-cultivo con Fb modificó el contenido proteico de las VEs: se observó unadisminución de las señales características de cadenas peptídicas en Fb-TPC-1 y un aumento en Fb-NThyOri. Las células NThyOri expuestas a VEs de Fb-NThyOri mostraron señales lipídicascompatibles con adherencia o fusión vesicular, mientras que las desafiadas con VEs de Fb-TPC-1 noevidenciaron cambiossignificativos, sugiriendo menor captación o diferente interacción VE-célula. Estas observacionesfueron corroboradas por CF y por análisis de descomposición de la banda Amida I.Nuestros hallazgos indican que componentes del microambiente tumoral influyen en el perfilbioquímico de las VEs, lo que podría condicionar su forma de interacción con las células blanco.