Efecto de la administración crónica de dexametasona sobre la expresión genética y las actividades metabólicas de enzimas de fase 1 en el higado y en la mucosa intestinal de ovinos

Abstract

La dexametasona (DEX) es un glucocorticoide con efectos antiinflamatorios e inmunosupresores, utilizado para estudiar diferentes mecanismos de expresión de genes que codifican enzimas involucradas en el metabolismo de xenobióticos. Por ejemplo, el tratamiento prolongado con DEX induce la expresión de CYP3A4 en humanos y modula la expresión de varias enzimas y sus respectivas actividades metabólicas en bovinos. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de la administración crónica de DEX (7 días a razón de 3 mg/kg/día) sobre la actividad y la expresión genética de diferentes enzimas de fase 1 en el hígado y en la mucosa intestinal de ovinos. Se prepararon microsomas hepáticos y de la mucosa intestinal para cuantificar las actividades metabólicas CYP3A, CYP1A y flavin-monooxigenasa (FMO) utilizando sustratos específicos de cada una. El nivel de expresión de estas enzimas se determinó a través de la cuantificación de los ARN mensajeros (ARNm) específicos utilizando PCR en tiempo real. El tratamiento crónico con DEX incrementó (p<0.01) las actividades metabólicas CYP3A-dependientes (triacetiloleandomicina N-desmetilasa = 310% y eritromicina N-desmetilasa = 195%) a nivel hepático. No hubo un aumento significativo de la expresión hepática del ARNm de CYP3A. Se observó una disminución de las actividades CYP1A (70%, p<0.001) y FMO (28%, p<0.05) a nivel hepático, no relacionada con los niveles de expresión de los ARNm de ambas enzimas. La actividad metabólica CYP3A-dependiente (eritromicina N-desmetilasa) fue 37.5% mayor (p<0.05) en la mucosa intestinal de los animales tratados con DEX, aunque no se detectaron diferencias significativas en los niveles del ARNm específico de esta enzima. DEX modificó en diferente grado la actividad y la expresión de las enzimas de fase 1 estudiadas. El efecto de la exposición a diferentes xenobióticos sobre la capacidad metabólica hepática e intestinal en rumiantes continúa bajo estudio en nuestro laboratorio.