Streptococcus uberis: Identicación y producción de biofilm

Abstract

Streptococcus uberis es el principal patógeno estreptocóccico ambiental responsable deuna elevada proporción de mastitis clínicas (MC) y subclínicas (MSC). Los biofilms sonresponsables de infecciones persistentes dado que las bacterias en el interior del biofilm(BF) están protegidas de la respuesta inmune del hospedador y de los antibióticos.Debido a que existe limitada información sobre la producción de BF en S. uberis, elobjetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la adición de diferentes suplementos almedio de cultivo sobre la producción in vitro de biofilm en 32 aislamientos de S. uberisobtenidos 17 tambos de la cuenca central de Argentina. Primeramente se realizó, laidentificación a nivel de especie de cada aislado según la metodología recomendadapara patógenos asociados a mastitis. Inicialmente, cada aislamiento fue examinado porsu respuesta a la tinción de Gram y prueba de catalasa. Las colonias de cocos Grampositivos en cadenas, y que resultaron catalasa negativos fueron identificadas a nivel deespecie en base a las pruebas bioquímicas de hidrólisis de hipurato, hidrólisis deesculina, crecimiento en cloruro de sodio 6.5% y crecimiento en bilis. La identificaciónmorfológica y bioquímica fue confirmada molecularmente por la amplificación del genpauA. Se observó una banda de aproximadamente 723 pb, correspondiente al amplicónpauA en 32 de los 34 aislamientos de S. uberis. Para investigar la producción de biofilmy cómo la misma es influenciada por el agregado de diferentes suplementos, losaislamientos fueron cultivados en caldo con glucosa 0.5%, sacarosa 1%, lactosa 1% oleche 0.5%, en placas de microtitulación. Los aislamientos fueron clasificados comofuerte, moderados, o débilmente productores de BF. Los resultados mostraron que lamayoría de S. uberis exhibe una moderada o débil producción de biofilm en cadacondición ensayada. Se observó además que la capacidad de producción de BF esmayor cuando el medio de cultivo TSB* es suplementado con glucosa 0.5 % o sacarosa1%; conjuntamente se observó que la producción de biofilm es dependiente de cadaaislamiento. La adherencia directa de la bacteria al tejido epitelial de la glándulamamaria es el paso más importante en la patogénesis de S. uberis y es el primer pasoen la formación de BF. Recientemente, se ha informado la capacidad de colonizar elepitelio de la glándula y establecer infecciones persistentes por S. uberis productoresde biofilm. Un conocimiento más profundo del posible rol del BF en la patogénesis de lamastitis bovina podría contribuir al diseño de nuevos inmunógenos tendientes a mejorarla condición sanitaria de los rodeos lecheros en los cuales predomine S. uberis.