Determinación de montelukast en muestras de interés farmacéutico y biológico mediante espectrofluorimetría en línea. Optimización multivariada

Abstract

Las metodologías de análisis por inyección en flujo ofrecen ventajas respecto del gasto de reactivos y muestra como así también en relación a la velocidad de muestreo. A pesar de ello, el número de variables que deben ser estudiadas exige la utilización de herramientas que permitan su optimización en simultáneo. En este sentido las técnicas de optimización multivariada contribuyen enormemente a minimizar el tiempo requerido para encontrar las condiciones experimentales óptimas [1]. El Montelukast (MKT) es una droga que es administrada para la sintomatología asociada a los procesos asmáticos y a la rinitis alérgica. En este sentido es indispensable realizar su monitoreo en fluidos biológicos de manera de ajustar su dosis en forma correcta. El objetivo de este trabajo fue desarrollar una metodología de análisis en línea con detección fluorescente (λex = 283 nm; λem = 397 nm) empleando taurodesoxicolato (TDC) como agente potenciador de la intensidad de emisión para la determinación de MKT en muestras biológicas de manera sensible, rápida y confiable. En el diseño del sistema en línea se utilizaron dos bombas peristálticas, una válvula de inyección de seis puertos y tubos de PVC de 0,8 mm d. i.. A los fines de preconcentrar el analito, se empleó una minicolumna de nanotubos de carbono. En el proceso de optimización se empleó un diseño experimental multivariado con el fin de encontrar las condiciones óptimas de sensibilidad y frecuencia de muestreo. La primera etapa del estudio (FFD) incluyó un total 2(6-1) = 32 experimentos y las variables estudiadas fueron: concentración de TDC, velocidad de carga de la muestra, composición del eluyente (concentración de HCl y de SDS) y velocidad de elución. En una segunda etapa, se diseñó un estudio de superficie respuesta (CCD), donde se analizó la influencia de las variables con efecto significativo sobre las respuestas estudiadas mediante uso de la función de deseabilidad. Las condiciones experimentales óptimas fueron: TDC = 5 × 10-5 M, velocidad de elución = 5 y velocidad de carga de la muestra = 14 rpm. Bajo estas condiciones se obtuvo una sensibilidad de 4,3 × 105 cps y una velocidad de muestreo de 45 muestras por hora que permitieron la determinación en forma exitosa de MKT en muestras farmacéuticas (comprimidos) y biológicas (orina), empleando instrumental de bajo costo sin generar desechos tóxicos.