Cribado de bioactividad (antihemolítica, anticoagulante y antiinflamatoria) de compuestos presentes en el extracto etanólico de hojas de Nectandra angustifolia

Abstract

Nectandra angustifolia (Schrad.) Nees & Mart. es una planta autóctona del NEA utilizada en la medicina tradicional por sus propiedades digestivas, purgantes, antiespasmódicas y para tratar reumatismo, artritis y dolor. También se emplean sus hojas para el tratamiento local de los efectos provocados por mordeduras de serpientes venenosas1. Previamente nuestro grupo ha confirmado sus propiedades antihemolíticas, anticoagulantes2-3, y, usando modelos in vitro e in vivo, hemos avanzado en la actividad antiinflamatoria4. No obstante, las bioactividades específicas de sus componentes aún no están completamente definidas. Este trabajo se centra en el aislamiento de los compuestos activos mediante HPLC preparativo y el análisis de sus actividades biológicas. Se utilizó un equipo HPLC Shimadzu LC-20 AR con detector UV-visible Shimadzu SPD-40 con columna Shim-pack GIS C18 250 x 14 mm 5 um tamaño partícula; ajustando las condiciones de corrida según estudios previos4. Se seleccionaron 8 picos compatibles con flavonoides y se evaluó su actividad anticoagulante, antihemolítica y antiinflamatoria. Para la actividad anticoagulante, los extractos fueron preincubados con veneno de Bothrops diporus y analizados por su efecto en la coagulación del plasma. Los picos 3, 5, 6 y 7 se distinguieron inicialmente (1 mg/mL), y a menor concentración (0,5 mg/mL), los picos 3 y 6 lograron inhibiciones del 26,4% y 28,7%, respectivamente. En la actividad antihemolítica, los extractos se incubaron con veneno y se analizaron los halos de hemólisis en placas de agar con glóbulos rojos y yema de huevo. El pico 6 destacó, con una inhibición del 42%, seguido por los picos 3, 5 y 7. A menor concentración, los picos 3 y 6 presentaron inhibiciones del 18%. La actividad antiinflamatoria se evaluó en macrófagos RAW 264.7 tratados con los picos seleccionados y estimulados con lipopolisacárido bacteriano. El pico 6 inhibió significativamente la producción de nitritos (31%), seguido por los picos 7 y 8. En conclusión, esta investigación identificó los picos 3 y 6 como los principales responsables de las actividades biológicas observadas, proponiéndolos como blancos para futuros estudios de identificación y caracterización química.