Tecnología de formulación: extracto de hojas de frutilla como inductor de crecimiento en Azospirillum argentinense REC3 bajo estrés osmótico

Abstract

El uso de inoculantes basados en microorganismos se ha expandido como práctica sustentable para mejorar la productividad de los cultivos en condiciones de estrés. Azospirillum spp. es una rizobacteria diazotrófica, capaz de promover el crecimiento de plantas e inducir la resistencia sistémica intrínseca al estrés abiótico. La aplicación de extractos vegetales como bioestimulantes es otra practica que está en auge; en este sentido, el extracto de hojas de frutilla (EHF) posee propiedades antimicrobianas, inductoras de la defensa y crecimiento vegetal. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto in vitro de un EHF sobre el crecimiento de Azospirillum argentinense REC3 (REC3) sometido a estrés osmótico. Para la preparación del inóculo bacteriano, un cultivo puro de REC3 fue crecido en medio Nfb líquido a 30°C, por 24 hs y en agitación. El efecto del EHF en el crecimiento de REC3 se evaluó mediante la suplementación del medio Nfb con 0.01 mg.PF mL-1 del EHF. Para establecer la condición de estrés osmótico en la bacteria, se adicionó Polietilenglicol 6000 (PEG) al 20% (p/v) en el medio de cultivo Nfb. Los tratamientos evaluados en el crecimiento de REC3 fueron: 1- Nbf (control); 2- Nfb +PEG; 3- Nfb +EHF 0.01; 4- Nfb + PEG+EHF 0.01. Los cultivos se incubaron a 30°C durante 48 hs bajo agitación (150 rpm) y se tomaron muestras en los tiempos 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 48 hs para evaluar parámetros de crecimiento: Log UFC mL-1, velocidad de crecimiento (μmax) y delta (Δ) de crecimiento (UFCf - UFCi). Finalmente, los cultivos frescos (24 hs) fueron observados bajo microscopía óptica (1000x) para evaluar cambios morfológicos debido a los tratamientos. Los resultados mostraron que la suplementación del medio Nfb con EHF incrementó significativamente los parámetros de crecimiento de REC3 bajo condiciones normales y bajo estrés osmótico (tratamientos 3 y 4, respectivamente). Además, el EHF revirtió los cambios pleomórficos y pérdida de motilidad producidos por PEG en las células de REC3. Este efecto inductor del crecimiento del EHF sobre REC3 deja planteada la posibilidad de estudiar su inclusión en el desarrollo de una formulación con propiedades promotoras del crecimiento para aplicar en cultivos expuestos a estrés.