Métodos cromatográficos

Abstract

Cromatografía es el término con el que se denomina a un conjunto de métodos analíticosutilizados para separar, identificar y cuantificar los componentes de una muestra. Mediante unacromatografía es posible separar analitos muy parecidos entre sí en cuanto a sus propiedadesfisicoquímicas. Por ejemplo, nos permite separar mezclas de aminoácidos, de proteínas, de ácidos grasos, de pigmentos, de pesticidas, entre otros.Para realizar una cromatografía se necesitan dos fases (fase estacionaria y fase móvil) yun soporte:Fase estacionaria (FE): es un componente que está contenido en un soporte adecuado y, comosu nombre lo indica, permanece fijo en un espacio determinado. Puede ser sólida o líquida.Fase móvil (FM): es un compuesto químico, o una mezcla sencilla de compuestos químicos y,como su nombre lo indica, debe fluir (moverse) a través de la fase estacionaria. La fase móvil es laque arrastra a la muestra obligándola a atravesar la fase estacionaria. Puede ser líquida o gaseosa.Por lo tanto, en toda cromatografía hay una fase estacionaria inmovilizada en un soporte yuna fase móvil que arrastra a la muestra a través de la fase estacionaria. Durante este proceso,cada componente de la muestra se va a desplazar según sus propias características fisicoquímicas, las cuales van a determinar que interaccione más con la fase estacionaria o que prefiera ala fase móvil. El concepto general es que aquellos analitos que interaccionen más con la faseestacionaria serán más retenidos, es decir, irán quedando más atrasados, mientras que aquellosque interaccionen más con la fase móvil se desplazarán más rápido. Así, los analitos se desplazan a diferentes velocidades dependiendo de su afinidad por cada fase, logrando separarse.Este método fue utilizado por primera vez en el año 1903 por el botánico ruso M. Tswett conel fin de separar pigmentos vegetales presentes en extractos de hojas. Este investigador utilizócarbonato de calcio (adsorbente) como fase estacionaria contenida en una columna de vidrio ymezclas de éter de petróleo/etanol como fase móvil para separar dichos pigmentos. El resultadoobtenido fue una serie de bandas coloreadas (verdes, naranjas y amarillas correspondientes aclorofilas, carotenos y xantófilas). En base a estos resultados, fue en 1906 cuando este investigador utilizó el término cromatografía para denominar a este método de separación, término que deriva del griego chroma que significa color y graphein que significa escribir.