Detección y caracterización molecular de Leptospira spp. en recursos hídricos superficiales del partido de Tandil

Abstract

La leptospirosis es una zoonosis distribuida mundialmente con una epidemiología compleja y con distintos reservorios animales y ambientales. El agua actúa como sitio de mantenimiento de diversas especies de Leptospira spp. que pueden ser saprófitas, intermedias o patógenas, representando un riesgo para las personas y los animales expuestos. El objetivo de este estudio fue detectar la presencia de Leptospira spp. en recursos hídricos superficiales del partido de Tandil empleando el cultivo bacteriológico con medios especiales/selectivos y PCR para determinar su potencial patógeno. Se realizó un muestreo por conveniencia obteniéndose 22 muestras de distintos arroyos. En cada sitio de muestreo se registraron variables como: temperatura y pH, y características del entorno como presencia de animales, urbanización, vegetación y usos del recurso. El cultivo bacteriológico se realizó en medio EMJH líquido con el agregado de sulfametoxazol, trimetoprima, anfotericina, fosfomicina y 5-fluorouracilo (STAFF). Paralelamente, 7/22 muestras se cultivaron en el medio HAN líquido + STAFF. La incubación se hizo a 28°C y se realizaron observaciones semanales con microscopía de campo oscuro. A partir de los días 11 y 14 se observaron espiroquetas en el medio HAN y EMJH, respectivamente. En 18/22 (82%) cultivos en EMJH y en 7/7 (100%) cultivos en HAN se observaron bacterias con morfología y movilidad compatibles con Leptospira spp. Se les realizó PCR utilizando como blanco de amplificación el gen ARNr 16S para género y el LipL32 para detección de especies intermedias o patógenas. En todos los cultivos se detectó Leptospira spp. pero en ninguno de ellos hubo amplificación del gen LipL32. Estos hallazgos subrayan la importancia del uso de medios de cultivo especiales con agregado de suplementos para la recuperación y diagnóstico de Leptospira spp. en muestras ambientales contaminadas. El estudio evidencia que los recursos hídricos superficiales de la región pueden actuar como reservorios ambientales de Leptospira spp. y podrían ser fuente de infección para humanos y animales. El análisis de secuenciación de las cepas aportará mayor información sobre la patogenicidad. Resulta fundamental continuar estudiando estos entornos, a fin de mitigar la exposición y el impacto de la leptospirosis en la Salud Pública y la Sanidad Animal.