Caracterización fenotípica in vitro de aislados de Venturia pyrina obtenidos de huertos comerciales de pera William´s de Río Negro
; Lutz, María Cecilia ; Suarez, Franco Marcelo ; Rivero Osimani, Valeria Leticia ; Ousset, Maria Julia ; Sosa, María Cristina Otros responsables
Fecha
Publicador:
Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas
Fecha de depósito:
5/12/2025
Fecha de creación:
1/1/2022-2024
Clasificación temática
Palabras clave
Resumen
Durante la temporada 2022/23, se monitorearon dos huertos comerciales de pera William’s, localizados en Ingeniero Huergo (IH, 39°04'58.5"S 67°13'13.0"W) y Villa Regina (VR, 39°08'07.8"S 67°02'53.6"W). A partir de noviembre, se recolectaron hojas y frutos con lesiones sarnosas que fueron llevados al laboratorio de fitopatología, FaCA- UNCO. De las lesiones, se logró obtener aislados monospóricos de Venturia pirina mediante la técnica de estriado. En total se obtuvieron 74 aislados de Venturia pyrina, 28 de Ing. Huergo y 46 de Villa Regina, procedentes de hojas y frutos, de los cuales 20, representativos de cada origen (Huergo hoja, Huergo fruto, Regina hoja y Regina fruto), se caracterizaron fenotípicamente in vitro y evaluó la germinación y viabilidad in vitro de los conidios en distintos tratamientos. De estos 20 aislados se seleccionaron ocho, dos por origen, para evaluar el crecimiento miceliar a distintas temperaturas.
Información Técnica
Caracterización fenotípica: Se presentan las variables que se utilizaron para la caracterización fenotípica de 20 aislados, -Identificación con número, huerto y órgano de procedencia (Origen), fecha y momento (según fenología del cultivo) de recolección, fecha de aislamiento en placa de Petri con APD. -Crecimiento miceliar: Se evaluó el crecimiento (mm/día) del diámetro promedio de la colina en APD (agar papa dextrosa) a 20ºC a 30 días desde el repique. - Morfotipos: los aislados crecidos en APD se agruparon en 4 Morfotipos distintos según el aspecto de la colonia. -Nro. de Cultivo: cepario de División Micología del Instituto Spegazzini de la Universidad Nacional de La Plata, donde a cada aislado se le asignó una identificación LPSC. - Nro. GenBank (ITS): Para realizar la identificación molecular, se realizó la extracción del ADN de los 20 aislados crecidos en APD de 30 días de edad. Se realizó la amplificación del gen ARNr (ITS 1/ ITS 4) y posterior secuenciación y comparación con aislados de referencia. Germinación: Datos utilizados para la evaluación de las variables relacionadas a la germinación de los conidios de los 20 aislados, separados por Origen. Suspensiones de conidios de 1.10 4 se incubaron en tubos Ependorf (Unidad experimental) en dos temperaturas (4 y 20°C) y tres tiempos de evaluación (6, 9 y 12 hs), con tres repeticiones. Para incluir en el análisis estadístico la unidad experimental se creó la variable “Tubo” que surge de cruzar las columnas Origen-Aislado- Tiempo- Temperatura- Repetición. Las variables respuestas del análisis estadístico fueron: porcentaje de conidios germinados (Con. Germ %), porcentaje de conidios elongados (Con. Elongados %), longitud promedio del conidio (um) (Long. Prom. Con.), longitud promedio del tubo germinativo (um) (Long. Prom. TuboG). Debido a la distribución No normal de los datos, las variables respuestas debieron transformarse: Raíz cuadrada (Raiz_ Con. Germ.): % Con. Germinados; Logaritmo base 10 más constante (0,01) (LOG10_Constante): % Con. Elongados; Logaritmo base 10 (LOG10_): Long. Prom. Con. y Long. Prom. TuboG. La columna “Unidad experimental” Viabilidad: datos utilizados para la evaluación de la viabilidad de los conidios de los 20 aislados, separados por Origen. Suspensiones de 1.103 conidios/ml fueron puestas a incubar en tubos Ependorf (Unidad Experimental) en dos temperaturas (4 y 20°C) y tiempos de evaluación (6, 9 y 12 hs) más testigo (0hs); con tres repeticiones. Al igual que para la en germinación, para incluir en el análisis estadístico la unidad experimental se creó la variable “Tubo” que surge al cruzar las columnas Origen-Aislado- Tiempo- Temperatura- Repetición. Se tomó la Vialidad de los conidios (%) como variable respuesta. Debido a la distribución No normal de los datos, la variable fue transformada por sumatoria de constante (0,01) (Viabilidad + constante) y posteriormente, raíz cuadra (Raíz_ (Viabilidad + cte)). Crecimiento miceliar de 8 aislados de V. pirina (2 por Origen). Se evaluó el crecimiento miceliar (mm) en 8 temperaturas (0-5-10-15-20-25-30 y 35 °C). A 30 días desde la siembra se midió el crecimiento diametral promedio de la colonia, que fue estandarizado como tasa de crecimiento miceliar (Crecimiento mm/ 30 dias), y como crecimiento relativo (Crecimiento por temperatura/ Max crecimiento). Ambos se tomaron como variables respuesta.
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