Capacidad de formar biofilms de aislamientos de Streptococcus agalactiae obtenidos de la cuenca Mar y Sierras

Abstract

Streptococcus agalactiae es uno de los productores de mastitis bovina más importantes, el cual se transmite, generalmente, de vaca a vaca o entre cuartos mamarios durante o poco después del ordeñe. El desarrollo de biofilms depende de la capacidad del patógeno para adherirse a células epiteliales mamarias bovinas y a superficies inertes. Al formar estas estructuras, las bacterias incrementan sus probabilidades de sobrevivir en entornos hostiles, resisten mejor la acción del sistema inmunitario del huésped y se vuelven menos sensibles a antibióticos y desinfectantes. S. agalactiae posee múltiples factores de virulencia que favorecen su adhesión a células epiteliales mamarias. El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad de formación de biofilms in vitro de aislamientos de S. agalactiae obtenidos de casos de mastitis bovina en la Cuenca Mar y Sierras (Provincia de Buenos Aires). Se analizaron 32 aislamientos provenientes de un único establecimiento, de diferentes orígenes (leche de vacas individuales, leche de tanque e hisopados rectales), identificados por pruebas bioquímicas y confirmados mediante la amplificación del gen dltR. La formación de biofilms se evaluó en placas de polietileno de 96 pocillos. Los aislamientos se cultivaron en caldo Todd Hewitt a 37 ˚C durante la noche, ajustándose posteriormente a una DO600=0,5. Se inoculó una alícuota de cada dilución en caldo Luria Bertani suplementado con 1% de glucosa y se incubó durante 48 h a 37 ˚C. La tinción se realizó con cristal violeta al 0,1 %, y la lectura de la densidad óptica se llevó a cabo a 570 nm. Cada aislamiento se evaluó por triplicado. Las densidades ópticas se compararon con la absorbancia media de los controles negativos clasificándolos como: no formadores de biofilms (DOa < DOc), débiles formadores de biofilms (DOc < DOa ≤ 2 DOc), moderados formadores de biofilms (2 DOc < DOa ≤ 4 DOc) y fuertes formadores de biofilms (4 DOa < 4 DOc). El 97 % de los aislamientos fueron fuertes formadores de biofilms y el 3%, moderados formadores de biofilms. Estos resultados muestran que las bacterias estudiadas poseen ventajas adaptativas que les permiten persistir y resistir, dificultando su erradicación mediante tratamientos convencionales.