SARSCov2 en retinitis degenerativa

Abstract

Las manipulaciones que incluyen al virus SARSCoV-2 requieren de infraestructura con nivel 3 de bioseguridad, cuando la mayor parte de los laboratorios de virología disponen de nivel 2 de bioseguridad. Una forma de hacer más accesible el trabajo en el laboratorio con virus que requieren de condiciones de alta bioseguridad para su manipulación, es el pseudotipado de partículas virales no replicativas. El pseudotipado es el armado o empaquetamiento de vectores lentivirales que exponen la proteína S1 en forma de espículas en su envoltura. Estos lentivirus pseudotipados son utilizados para la infección de las células de interés. La entrada del vector a la célula es estrictamente determinada por la proteína S1 que el vector expresa en su envoltura, y se lo denomina transducción. Como consecuencia de la transducción, la célula expuesta al vector viral sufre el impacto de la expresión de la información genética que el vector aporta, como son los genes marcadores de fluorescencia o luciferasa, y que permiten realizar estudios en los eventos asociados a la proteína S1 y gatillados por la infección viral. El objetivo general del presente proyecto es la producción de ADN plasmídico de alta calidad y concentración, tal que, por co-transfección en células de la línea HEK293T, se obtenga el empaquetamiento eficaz del vector lentiviral que exprese la proteína S1 de SARSCov-2 en sus espículas, y su posterior uso en la transducción de células epiteliales de la retina.