Método alternativo para obtener y transportar bloques de tejido para microscopía

Abstract

Se describe un método simple y económico para congelar material biológico destinado a la obtención de cortes histológicos en crióstato. Se propone la utilización de CO2 para producir una mezcla refrigerante en reemplazo del nitrógeno líquido como criogénico. Esta mezcla (compuesta por hielo seco y acetona) enfría el isopentano utilizado como medio de congelación hasta -76ºC y lo mantiene por aproximadamente una hora y media permitiendo la congelación de más de 20 bloques de tejido. La calidad de las secciones obtenidas en crióstato es similar a aquellas obtenidas mediante la utilización de nitrógeno líquido. Este método resulta especialmente práctico durante los muestreos a bordo de embarcaciones y/o en sitios alejados de los centros urbanos.A cheap and simple method for freezing raw biological material destined to obtain histological sections through a cryostat is described. We propose the utilization of solid CO2 (dry ice) to make a cooling mixture, instead of liquid nitrogen. The temperature of the refrigerating mixture (composed by acetone and dry ice) reaches isopentane to -76ºC which is maintained for ~1.5h allowing the freezing of more than 20 tissue blocks. The quality of cryostat sections obtained is similar to the ones obtained by using liquid nitrogen. This method is particularly suitable during sampling on board, and/or far away from urban centers.