Empleo de proteínas inmovilizadas en soportes nanoestructurados para la separación de contaminantes emergentes quirales

Abstract

Los contaminantes emergentes que suscitan mayor preocupación y que han sido mayormente estudiados en los últimos años son los fármacos. La mayor parte de los β-bloqueantes se comercializan y administran como la mezcla racémica de ambos, pero para la mayor parte de estos fármacos, el enantiómero (S) es farmacológicamente activo, mientras que el otro enantiómero no lo es, e incluso puede tener efectos negativos y tóxicos. Debido a las diferentes características físicas y químicas que presentan los nanomateriales, la evaluación de los mismos para ser utilizados como nuevos soportes en columnas de separación es de suma importancia. En nuestro grupo de trabajo se ha evaluado el uso de nanomateriales para el mejoramiento de la sensibilidad y resolución en la separación de diferentes analitos. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un sistema capaz de separar componentes quirales de una mezcla racémica de contaminantes emergentes. Específicamente pindolol y propanolol, β-bloqueantes empleados en el tratamiento de los trastornos del ritmo cardíaco. En el presente trabajo se desarrollo una columna de separación utilizando como soporte nanotubos de carbono de pared múltiple. En la pared de los mismos se inmovilizaron proteínas, como albumina y avidina, las cuales presentan características de ser selectores quirales. Para el armado de la columna se pesaron de 2,7 a 12 mg de los nanotubos inmovilizados. En la parte posterior de la misma se le colocó un filtro 0.45 μ. Las muestras inyectadas fueron determinadas utilizando un equipo de HPLC que constó de una columna C18 y la fase móvil utilizada fue Acetinitrilo/buffer fosfato (28:72). Los resultados mostraron una alta resolución y una importante diferencia en el tiempo de retención de los analitos quirales en la columna desarrollada. La metodología propuesta también mostró una alta reproducibilidad y repetitividad entre separaciones, días a día y el uso de diferentes columnas.