Evento
Alteración del citoesqueleto de megacariocitos durante la producción de plaquetas inducida por drogas utilizadas en neoplasias mieloproliferativas
Cellucci, Adela Soledad
; Lev, Paola Roxana
; Yañuk, Danila Belén
; Goette, Nora Paula
; Glembotsky, Ana Claudia
; de Luca, Geraldine
; Lira, María Cecilia
; Baroni Pietto, Maria Constanza
; Heller, Paula Graciela
; Marta, Rosana Fernanda
Tipo del evento:
Jornada
Nombre del evento:
XVII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari
Fecha del evento:
11/2023
Institución Organizadora:
Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Médicas;
Título del Libro:
XVII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari
Editorial:
Lanari
Idioma:
Español
Clasificación temática:
Resumen
Previamente reportamos cambios en el diámetroplaquetario máximo (DPM) en pacientes con neoplasiasmieloproliferativas crónicas Phi negativas tratados condistintas drogas. Mientras que Anagrelide (ANA),Interferón alfa (IFNa) y Ruxolitinib (Ruxo) indujeronaumento, Hidroxiurea (HU) provocó disminución delDPM. El estudio del citoesqueleto de plaquetas depacientes demostró alteraciones en la organización demicrotúbulos en las plaquetas de mayor tamaño.Mediante estudios in vitro utilizando megacariocitos(MK) provenientes de progenitores hematopoyéticos desangre de cordón umbilical, evaluamos la morfología delas proplaquetas (PP), prolongaciones que se originanen el MK y dan origen a las plaquetas durante el procesode trombopoyesis, a través de la medición del diámetrode tips y swellings (principales estructurasproplaquetarias). Observamos que ANA e IFNaprodujeron aumento del tamaño de estas últimas,mientras que Ruxo e HU no tuvieron este efecto. En elpresente estudio profundizamos en las causas de estoscambios a través de dos estrategias: A) Análisis de lamorfología del citoesqueleto de MK porinmunofluorescencia indirecta. En las células tratadascon ANA observamos una disminución del porcentaje deMK con polarización de actina (faloidina-FITC) (ANOVAde una vía, p<0.05), lo que sugiere alteración de laformación de la membrana de demarcación necesariapara el inicio de la trombopoyesis, así comodesorganización microtubular (anti-alfa tubulina-FITC)(test t apareado p<0.05), lo que interferiría en laelongación de PP. En MK tratados con IFNa se observódesorganización de microtúbulos (p<0.05), mientras quela estructura del citoesqueleto de actina estuvoconservada. B) Para identificar posibles blancosmoleculares responsables del efecto de las drogassobre la estructura del citoesqueleto, se realizó unanálisis bioinformático de la expresión génica en MKhumanos tratados con ANA obtenidos por Ahluwalia ycol. (Gene Expression Omnibus database: GSE60621,platform GPL570). Del grupo de genes down-reguladospor tratamiento con ANA se seleccionó el CCL5 quecodifica para RANTES, citoquina inflamatoria queestimula la formación de PP. En nuestro sistemaconfirmamos disminución de la expresión de CCL5 porPCR en tiempo real, en MK tratados con ANA respectoal control (test t, p<0.01). IFNa también produjodisminución de la expresión de RANTES (p<0.001)mientras que Ruxo indujo su aumento (p<0.0001). Laliberación de RANTES al medio condicionado de MKestuvo disminuida en presencia de ANA (p<0.05),normal en presencia de IFNa, y aumentada con Ruxo(p<0.01). Estos resultados indican una regulaciónselectiva de RANTES por las distintas drogasestudiadas, y revelan que ANA e IFN, que inducenalteraciones del citoesqueleto de PP, se asocian condisminución de la expresión de RANTES, mientras queRuxo, que no altera el tamaño de tips y swellings, induceaumento de esta quemoquina. Se encuentran en cursoestudios tendientes a identificar las vías de señalizacióninvolucradas entre RANTES y el citoesqueletomegacariocítico.
Palabras clave:
Citoesqueleto
,
Megacariocitos
,
Neoplasias Mieloproliferativas
,
Plaquetas
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Citación
Alteración del citoesqueleto de megacariocitos durante la producción de plaquetas inducida por drogas utilizadas en neoplasias mieloproliferativas; XVII Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; Argentina; 2023; 23-24
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