Análisis comparativo de combinaciones duales de marcadores inducidos por activación (Activation induced markers) para identificar células T CD4+ y CD8+ específicas para T. cruzi en pacientes con enfermedad de Chagas crónico

Abstract

Las células T antígeno-específicas cumplen un rol central en la respuesta inmune adaptativa frentea la infección con el parásito Trypanosoma cruzi (T. cruzi). En este contexto, el presente estudiose focaliza en analizar el uso de ensayos que permiten detectar dichas células target basadosen la sobre-expresión de marcadores inducidos de activación a partir del reconocimiento por elreceptor de células T de los complejos péptidoCMH (denominados ensayos de AIM, del inglés“activated induced markers”). Se testearon diferentes combinaciones duales de marcadoresde activación para identificar linfocitos T CD4+ y CD8+ activados específicamente en célulasmononucleares de sangre periférica de pacientes con Enfermedad de Chagas crónico(ECC) e individuos no-infectados luego de la estimulación con lisado de T. cruzi durante 12 o24 hs. Los resultados mostraron que los ensayos de AIM combinando la expresión de OX40, CD25,CD40L, CD137, CD69 y/o PD-L1 permiten detectar células T CD4+ T. cruzi-específicas en lospacientes con ECC, a ambos tiempos de estimulación. Para las células T CD8+, la coexpresión de PD-L1/OX40 luego de 24 hs de incubación con el antígeno resultó ser la más adecuada para identificar la respuesta antígenoespecífica, aunque la magnitud de activación fue menor que para las células T CD4+. Utilizando las combinaciones duales previamente descriptas, se demostró que la activación celular T específica (tanto de células CD4+ como CD8+) es mediada por diferentes cepas de T. cruzi. A la vez que, la caracterización en base a la expresión de CD45RA y CCR7 evidenció linfocitos T activados con fenotipo naïve y/o de memoria dependiendo de la cepa de parásito utilizada. En conclusión, este trabajo expone que las distintas combinaciones de marcadores de activación representan una técnica simple y efectiva para la detección de células T CD4+ y CD8+ T. cruzi específicas.