Caracterización de dos lipasas termoresistentes producidas por Bacillus licheniformis P1

Abstract

Las lipasas constituyen un grupo de enzimas que catalizan reacciones de hidrólisis y síntesis las cuales, en muchos casos se realizan más eficientemente a temperaturas elevadas. Las enzimas de microorganismos termófilos han demostrado ser por sí mismas más resistentes a la temperatura que una gran variedad de enzimas en las mismas condiciones. Por todo esto, las enzimas termoresistentes representan una alternativa prometedora para el desarrollo de procesos industriales biocatalíticos. OBJETIVO. Caracterización de dos lipasas termoresistentes producidas por Bacillus licheniformis P1. MATERIALES Y METODOS. Se determinó el peso molecular mediante un SDS-PAGE de dos lipasas purificadas a partir de un sobrenadante de cultivo de B. licheniformis. Se determinó también su punto isoeléctrico (pI) en un gel de poliacrilamida al 10 % con gradiente de pI. Se evaluó la especificidad de sustrato en reacciones de hidrólisis utilizando: p-nitrofenil acetato (C2), caproato (C6), caprato (C10), laurato (C12), palmitato (C16) y estearato (C18). RESULTADOS Y CONCLUSIÓN. Las lipasas purificadas fueron identificadas como Lip1 y Lip2. Las mismas mostraron un peso molecular aparente en SDS-PAGE de 15,4 kDa para Lip1 y 11,0 kDa para Lip2. Ambas enzimas mostraron su punto isoeléctrico en la zona de los pH ácidos. Con respecto a la especificidad de sustrato, se realizó una comparación del comportamiento de Lip1 y Lip2. Lip1 mostró actividad hidrolítica elevada frente a sustratos de cadena media y larga (C6 ? C18). Lip2 mostró una marcada especificidad hacia la hidrólisis del p-nitrofenilcaproato (C6). Lip2 mostró alta especificidad de sustrato a diferencia de Lip1, que no mostró diferencia significativa entre sustratos de cadenas medias y largas en su actividad hidrolítica.