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dc.contributor.author
de Castro, Rosana Esther
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dc.contributor.author
Ruiz, Diego Mario
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dc.contributor.author
Gimenez, Maria Ines
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dc.contributor.author
Silveyra, María Ximena
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dc.contributor.author
Paggi, Roberto Alejandro
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dc.contributor.author
Maupin Furlow, Julie A.
dc.date.available
2021-06-16T12:36:11Z
dc.date.issued
2008-09
dc.identifier.citation
de Castro, Rosana Esther; Ruiz, Diego Mario; Gimenez, Maria Ines; Silveyra, María Ximena; Paggi, Roberto Alejandro; et al.; Gene cloning and heterologous synthesis of a haloalkaliphilic extracellular protease of Natrialba magadii (Nep); Springer Tokyo; Extremophiles; 12; 5; 9-2008; 677-687
dc.identifier.issn
1431-0651
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/133979
dc.description.abstract
The gene encoding the protease Nep secreted by the haloalkaliphilic archaeon Natrialba magadii was cloned and sequenced. Upstream of the nep gene, a region related to haloarchaeal TATA-box and BRE-like consensus sequences was identified. The nep-encoded polypeptide had a molecular mass of 56.4-kDa, a pI of 3.77 and included a 121-amino acid propeptide not present in the mature Nep. A Tat motif (GRRSVL) was also identified at residues 10 to 15 suggesting it is a substrate of the Tat pathway. The primary sequence of Nep was closely related to serine proteases of the subtilisin family from archaea and bacteria (50 to 85% similarity). The nep gene was expressed in Escherichia coli and Haloferax volcanii resulting in production of active Nep protease. In contrast to the recombinant E. coli strains in which Nep activity was only detected in cell lysate, high levels of Nep protein and activity were detected in the culture medium of stationary phase recombinant Hfx. volcanii strains. The Hfx. volcanii synthesized protease was active in high salt, high pH and high DMSO. This study provides the first molecular characterization of a halolysin-like protease from alkaliphilic haloarchaea and is the first description of a recombinant system that facilitates high-level secretion of a haloarchaeal protease.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Springer Tokyo
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
GENE CLONING AND EXPRESSION
dc.subject
HALOALKALIPHILIC PROTEASE
dc.subject
NATRIALBA MAGADII
dc.subject
SOLVENT TOLERANCE
dc.subject
TAT PATHWAY
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
Gene cloning and heterologous synthesis of a haloalkaliphilic extracellular protease of Natrialba magadii (Nep)
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2021-02-18T15:48:05Z
dc.journal.volume
12
dc.journal.number
5
dc.journal.pagination
677-687
dc.journal.pais
Japón
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dc.journal.ciudad
Tokyo
dc.description.fil
Fil: de Castro, Rosana Esther. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Ruiz, Diego Mario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Gimenez, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Silveyra, María Ximena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentina. Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Instituto de Neurociencia de Alicante; España
dc.description.fil
Fil: Paggi, Roberto Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Maupin Furlow, Julie A.. University of Florida. Department of Microbiology and Cell Science; Estados Unidos
dc.journal.title
Extremophiles
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00792-008-0174-6
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1007/s00792-008-0174-6
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