MARIELA PAULA BAYARDO

Datos académicos

Lugar de trabajo CONSEJO NACIONAL DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS Y TECNICAS / CENTRO CIENTIFICO TECNOLOGICO CONICET - LA PLATA / INSTITUTO DE FISIOLOGIA VEGETAL | UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA / FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MUSEO / INSTITUTO DE FISIOLOGIA VEGETAL
Título Licenciada en Ciencias Biológicas, especialización en Biología Molecular
Grado Universitario de grado
Especialidad 1. Continuando con lo informado en 2014, se caracterizará las plantas transgénicas SAG12-GFP de A.thaliana. Para esto coordinaré el trabajo con otros CPA, la CPA Profesional Diana Lauff se encargará de la microscopía de fluorescencia, y la CPA técnica de laboratorio, María Celeste Molina Agostini,desarrollará técnicas de biología molecular que se realizan en el instituto. Se obtendrán además nuevas líneas de A.thaliana con diferentes background génicos mediante cruzamiento con la línea obtenida con SAG12-GFP. 2. Dado que el INFIVE ha adquirido un equipo de PCR cuantitativa (StepOnePlus Real Time PCR de Applied Biosystems), realizaré el curso de capacitación a cargo de la empresa Thermo Fischer, y desarrollaré estrategias para cuantificar la expresión relativa de distintos genes mediante PCR cuantitativa. Tengo experiencia previa en esta técnica y seré una de las personas responsables y encargadas de la utilización de este equipo, que además se empleará para la realización de servicios a terceros a mi cargo. 3. En el marco de un proyecto de investigación de caracterización fisiológica y estructural de proteínas mitocondriales específicas de plantas, pondré a punto la técnica de coinmunoprecipitación utilizando un anticuerpo contra la proteína mitocondrial L-Galactono-1,4-lactona deshidrogenasa (L-GalLDH). Se trabajará con distintas líneas de A.thaliana y se procederá a la obtención de una fracción enriquecida en mitocondrias. Se empleará la proteina A sepharosa, que une a la región Fc de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas, y tras la elución de las proteínas coinmunoprecipitadas con L-GalLDH, se procederá al análisis del perfil proteico. 4. Continuando con lo informado en 2014, en relación con el screening de plantas de A. thaliana doble mutantes VTC2-EIN4, se asistirá técnicamente al tesinista en los experimentos que deba realizar, y en el análisis de los resultados obtenidos. 5. Diseño de una estrategia de PCR cuantitativa para la expresión relativa de los transcriptos de los genes SAG12 y ATG7 en A. thaliana. Dichos genes se localizan en el cromosoma 5, muy próximos entre sí, por lo cual es importante un buen diseño de primers que permita su discriminación, y permita determinar si la expresión de ambos se encuentra, o no, ligada. 6. Diseño de una estrategia génica para identificar plantas de A. thaliana mutantes simples y doble KO (mutantes por inserción de T-DNA) para las clorofilas ATCHL1 y ATCHL2. Mediante PCR se buscará identificar qué plantas corresponden al doble y simple mutantes. 7. Determinación de número de células endospermáticas de trigo. Se pondrá a punto un protocolo donde se procederá a la fijación de las células, se tratará con las enzimas celulasa y α-amilasa, y se estimarán los núcleos endospermáticos mediante conteo en microscopio óptico. 8. En el marco de la convocatoria de becas para CPA en el exterior, me he postulado a la misma en el llamado de agosto 2015. En el INFIVE se desarrollan distintas líneas de trabajo enfocadas al estudio de especies vegetales de interés agronómico, como tomate (Solanum lycopersicum), maíz (Zea mays), trigo (Triticum aestivum) y frutilla (Fragaria vesca; Fragaria ananassa), y existe una necesidad creciente de los diferentes grupos de investigación para realizar en nuestro instituto la transformación génica de dichas especies para el estudio de diversos procesos fisiológicos, de modo de obtener información sobre los genes de interés en el contexto de la planta. Me he presentado al concurso de becas para realizar un entrenamiento de 4 meses en las técnicas descriptas bajo la dirección del doctor Thomas Clemente. El Dr. Clemente es un referente en transformación génica de especies vegetales, se desempeña como director del Plant Transformation Core Research Facility en la Universidad de Nebraska (USA), y en la actualidad dirige programas de transformación en soja, trigo, maíz y sorgo. 9. Se continuará con activa participación en actividades de divulgación a estudiantes de escuelas primarias y secundarias, y comunidad en general, tanto en el marco del Día Internacional de la Fascinación por las Plantas (22 de mayo), como en jornadas de divulgación científica para escuelas primarias y secundarias organizadas eventualmente por el CCT-CONICET-La Plata. 10. Se continuará con la realización de las siguientes tareas: Acondicionamiento y mantenimiento de equipos de uso general (equipo de ósmosis inversa, granizadora, termocicladora, pHmetros, etc); compras generales del laboratorio; extracción de material genético de plantas y microorganismos asociados (ADN-ARN), por diversos protocolos, y proteínas para realizar corridas de PCR, qPCR y Western-blot; caracterización de plantas transgénicas mediante análisis génico y perfil proteico.