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PICT-2013-0958 Dra. Flavia Andrea Bollati
Estrés y vulnerabilidad a la adicción a cocaína: regulación de las RhoGTPasas en la plasticidad sináptica en núcleo acumbens core y shell. Mediante el ensayo de actividad de las RhoGTPasas identificaremos los cambios en los niveles de actividad de las GTPasas pequeñas y su efecto en la señalización cascada abajo luego de la exposición a estrés crónico y cocaína en NA core y NA shell.
El NA core y NA shell de ambos hemisferios cerebrales será disecado para los experimentos. La fracción de PSD será separada de la fracción no-PSD a partir de la fracción de membrana sinaptosomal. Brevemente un pool de tejido bilateral de NA core y shell será homogenizado y centrifugado a fin de separar la fracción nuclear. El sobrenadante resultante será centrifugado nuevamente obteniéndose la fracción de sinaptosoma crudo. Esta fracción será resuspendida y luego de una incubación centrifugada. La fracción de PSD será utilizada para realizar el ensayo de actividad de las RhoGTPasas. Además evaluaremos por western blot, la inmunoreactividad de varias proteínas involucradas en las vías de señalización de las RhoGTPasas.Título: Influencia de eventos emocionalmente relevantes sobre la dinámica característica de la memoria de extinción: bases sináptico-celulares y su implicancia en desórdenes de miedo y ansiedad.
Préstamo BID-PICT: 13-1401 Dr Gaston Calfa
Densidad y forma de espinas dendríticas. Fijación por perfusión intracardíaca, cortes con vibrátomo. A rebanadas previamente fijadas con una solución de PFA al 4% y usando un microscopio invertido se procederá a administrar un colorante fluorescente (DiI, Probe, Eugene, OR) en regiones apicales del árbol dendrítico de CA1 hipocampal. Posteriormente se colocará la misma en una solución conteniendo PFA 4% para su fijación, luego se la montará en porta objetos para una posterior visualización por medio de microscopia confocal. Secciones ópticas en el eje Z serán adquiridas a pasos de 0.1µm. ImageJ será utilizado para el posterior análisis referido a la densidad y la morfología de las espinas.
PIP 112 201301 00493 Dr. Molina, Víctor Alejandro. Modulación del proceso de labilización/reconsolidación de una memoria de miedo por exposición a eventos emocionalmente negativos IFEC-CONICET
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Datos de investigación Dendritic spines and fear memory(2023)
(Pergamon-Elsevier Science Ltd, 2010-08)