Respuesta inmune local en la patogenia del aborto inducido por herpesvirus equino 1

Abstract

El alfaherpesvirus equino 1 produce alteraciones reproductivas que ocasionan importantes pérdidas económicas, además de las que suceden a nivel respiratorio y nervioso. En esta tesis se utilizó el modelo murino BALB/c para estudiar algunos cambios en el útero y las placentas de ratonas preñadas y experimentalmente infectadas que pudieran producir la pérdida de continuidad del conceptus. Se describieron las lesiones en los pulmones, el útero y las placentas y se estudiaron los cambios vasculares y en la proliferación y muerte celular por inmunohistoquímica. Se analizaron los niveles en la expresión de algunas citoquinas por qPCR, citometría de flujo y por ELISA. Las ratonas infectadas manifestaron signos clínicos respiratorios y en sus pulmones lesiones histopatológicas típicas, con aislamiento viral y detección de ADN positivos. En las placentas infectadas el aislamiento viral y detección de ADN fueron negativos. Sin embargo, presentaron congestión vascular, ocasionales trombos en pequeños vasos de las capas de espongiotrofoblasto y decidua, aumento en el área del laberinto, y reducción significativa en el endotelio capilar fetal. También se redujo significativamente la proliferación celular, mientras que la apoptosis fue significativamente mayor. La regulación local de la expresión de IL-10, TNF-α, IFN-γ, Foxp3 e IL-4 también difirió en el útero y las placentas del grupo infectado con respecto al control. Hubo un fuerte incremento de la respuesta Th1, mayormente representado por IFN-γ, acompañada por una respuesta Th2 tolerogénica, cuyo fin podría ser restaurar el balance homeostático ante la infección. Los datos obtenidos permiten afirmar que se producen cambios celulares y moleculares a nivel de la respuesta inmune local debido a la infección. La comprensión del impacto inmunológico de la infección sistémica y local por el virus en el modelo murino ayudará a abordar estudios en equinos para mejorar las estrategias profilácticas y terapéuticas.

Equid alfaherpesvirus 1 causes respiratory, nervous and reproductive disorders, being the latter those that produce high economic losses in Argentina. In this thesis, the BALB/c mice model was used to study some changes in the uterus and placentas of pregnant and experimentally infected mice that could explain the loss of the conceptus. We described the histopathological lesions present in the lungs, uteri and placentas of the infected mice, in addition to placental vascular alterations, and studied cellular proliferation and death changes by immunohistochemistry. In addition, the expression of some cytokines was analyzed by qPCR, flow cytometry and ELISA. The infected mice showed respiratory clinical signs, and histopathological lesions of EHV-1 infection in their lungs, which were also positive to virus isolation and DNA detection. On the other hand, virus isolation and DNA detection were negative in the infected placentas. However, vascular congestion, occasional thrombi in small vessels of spongiotrophoblast layers and decidua, an increase in the labyrinth area, and a significant reduction in fetal capillary endothelium surface were described in them. Besides, cell proliferation was significantly reduced whereas apoptosis was increased. Local expression of IL-10, TNF-α, IFN-γ, Foxp3 and IL-4 also differed in the uteri and the placentas of infected group in comparison to control mice. There was a strong increase in Th1 response, mostly represented by IFN-γ, but also a tolerogenic Th2 response which may be used to restore the immunological homeostasis in response to infection. Here, we have shown changes in the local immune response induced by the infection. The understanding of the immunological impact of systemic and local EHV-1 infection in the murine model will help to address future studies in the natural host to improve prophylactic and therapeutic strategies.