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dc.contributor.author
Sabatini, Martín  
dc.contributor.author
Comba, Santiago  
dc.contributor.author
Altabe, Silvia Graciela  
dc.contributor.author
Recio Balsells, Alejandro Iván  
dc.contributor.author
Labadie, Guillermo Roberto  
dc.contributor.author
Takano, Eriko  
dc.contributor.author
Gramajo, Hugo Cesar  
dc.contributor.author
Arabolaza, Ana Lorena  
dc.date.available
2019-11-14T14:56:55Z  
dc.date.issued
2018-12  
dc.identifier.citation
Sabatini, Martín; Comba, Santiago; Altabe, Silvia Graciela; Recio Balsells, Alejandro Iván; Labadie, Guillermo Roberto; et al.; Biochemical characterization of the minimal domains of an iterative eukaryotic polyketide synthase; Wiley Blackwell Publishing, Inc; Febs Journal; 285; 23; 12-2018; 4494-4511  
dc.identifier.issn
1742-464X  
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/88856  
dc.description.abstract
Iterative type I polyketide synthases (PKS) are megaenzymes essential to the biosynthesis of an enormously diverse array of bioactive natural products. Each PKS contains minimally three functional domains, β-ketosynthase (KS), acyltransferase (AT), and acyl carrier protein (ACP), and a subset of reducing domains such as ketoreductase (KR), dehydratase (DH), and enoylreductase (ER). The substrate selection, condensation reactions, and β-keto processing of the polyketide growing chain are highly controlled in a programmed manner. However, the structural features and mechanistic rules that orchestrate the iterative cycles, processing domains functionality, and chain termination in this kind of megaenzymes are often poorly understood. Here, we present a biochemical and functional characterization of the KS and the AT domains of a PKS from the mallard duck Anas platyrhynchos (ApPKS). ApPKS belongs to an animal PKS family phylogenetically more related to bacterial PKS than to metazoan fatty acid synthases. Through the dissection of the ApPKS enzyme into mono- to didomain fragments and its reconstitution in vitro, we determined its substrate specificity toward different starters and extender units. ApPKS AT domain can effectively transfer acetyl-CoA and malonyl-CoA to the ApPKS ACP stand-alone domain. Furthermore, the KS and KR domains, in the presence of Escherichia coli ACP, acetyl-CoA, and malonyl-CoA, showed the ability to catalyze the chain elongation and the β-keto reduction steps necessary to yield a 3-hydroxybutyryl-ACP derivate. These results provide new insights into the catalytic efficiency and specificity of this uncharacterized family of PKSs.  
dc.format
application/pdf  
dc.language.iso
eng  
dc.publisher
Wiley Blackwell Publishing, Inc  
dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess  
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/  
dc.subject
DOMAIN DECONSTRUCTION  
dc.subject
ITERATIVE PKS  
dc.subject
PKS BIOCHEMISTRY  
dc.subject
SUBSTRATE SPECIFICITY  
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular  
dc.subject.classification
Ciencias Biológicas  
dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS  
dc.title
Biochemical characterization of the minimal domains of an iterative eukaryotic polyketide synthase  
dc.type
info:eu-repo/semantics/article  
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo  
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion  
dc.date.updated
2019-10-24T18:19:20Z  
dc.journal.volume
285  
dc.journal.number
23  
dc.journal.pagination
4494-4511  
dc.journal.pais
Reino Unido  
dc.journal.ciudad
Londres  
dc.description.fil
Fil: Sabatini, Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina  
dc.description.fil
Fil: Comba, Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina  
dc.description.fil
Fil: Altabe, Silvia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina  
dc.description.fil
Fil: Recio Balsells, Alejandro Iván. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Química Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Química Rosario; Argentina  
dc.description.fil
Fil: Labadie, Guillermo Roberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Química Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Química Rosario; Argentina  
dc.description.fil
Fil: Takano, Eriko. University of Manchester; Reino Unido  
dc.description.fil
Fil: Gramajo, Hugo Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina  
dc.description.fil
Fil: Arabolaza, Ana Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina  
dc.journal.title
Febs Journal  
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1111/febs.14675  
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://febs.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/febs.14675