Combinaciones de extractos de plantas entre sí y con antifúngicos comerciales como medio de potenciar la actividad contra hongos patogénicos para el humano

Abstract

En los últimos años las enfermedades fúngicas han emergido como importantes problemas de salud pública dada su morbilidad y mortalidad (Diekema y Pfaller 2004; Brown y col. 2012; Darius y col. 2014). Si bien existen diferentes tipos de antifúngicos que han permitido avanzar en el tratamiento de infecciones por hongos (Odds 2003), los mismos presentan serios inconvenientes. Es por ello que se han planteado nuevos enfoques terapéuticos, entre ellos utilizar terapias combinadas para el tratamiento de infecciones fúngicas (Denning y Hope, 2010; Cuenca-Estrella, 2004). Las terapias combinadas son menos propensas a desarrollar resistencia, aumentan la eficacia terapéutica, aumentan el espectro de acción y presentan menor toxicidad (Kontoyiannis y Lewis, 2004).En esta tesis se decidió trabajar con este nuevo paradigma basado en la terapia en combinación, y por lo tanto nuestro objetivo fue estudiar diferentes mezclas que contengan extractos vegetales preparados a partir de plantas endémicas y nativas de Argentina, combinados entre sí o con antifúngicos comerciales, de manera tal de seleccionar aquellas en las cuales se potencie la actividad antifúngica (sinergismo).Si bien existen varios métodos para evaluar sinergismo entre componentes en una mezcla, en esta tesis se seleccionaron dos de ellos: el método de efectos mixtos o MixLow (Boik y col. 2008) y el método del Tablero de Ajedrez (Martinez-Iraujo 1996). El primero se utilizó para determinar el tipo de interacción presente en 4 diferentes mezclas bi-herbarias preparadas a partir de extractos de Zuccagnia punctata (ZpE) y Larrea litida (LnE), donde estas plantas fueron recolectadas en 4 períodos distintos de un año (febrero, mayo, septiembre y noviembre). Mientras que el método del Tablero de Ajedrez se utilizó para determinar las interacciones entre extractos MeOH, DCM y BuOH de frutos, hojas y raíces de Phytolacca tetramera con antifúngicos comerciales (anfotericina B, itraconazol, posaconazol y caspofungina). En ambos casos, se utilizaron Candida albicans y C. glabrata como cepas blanco para el estudio de actividad antifúngica en combinación, debido a su importancia en clínica.Mediante el método MixLow se pudo determinar que tres de las cuatro mezclas ZpE-LnE estudiadas mostraron sinergismo frente a C. albicans, mientras que sólo una mostró sinergismo contra C. glabrata. El estudio químico de las mezclas más sinérgicas permitió cuantificarlas respecto de su composición en los compuestos marcadores 2´,4´-dihidroxi-3´-metoxichalcona, 2´,4´-dihidroxichalcona, pinocembrina, galangina, ácido nordihidroguayarético, ácido 3′-metilnordihidroguayarético y 4-[4-(4-hidroxifenil)-2,3-dimetilbutil]-benceno-1,2-diol.Por otro lado, mediante el método del Tablero de Ajedrez se detectaron 18 combinaciones sinérgicas de los 9 extractos de P. tetramera con itraconazol y posaconazol, mientras que sólo dos combinaciones fueron sinérgicas con anfotericina B (formadas por los extractos MEOH y DCM de frutos de P. tetramera). Las mezclas más sinérgicas fueron cuantificadas respecto a sus componentes marcadores fitolacósido B, fitolacósido E y fitolacagenina.