In vitro effect of Chrysosporium indicum and Chrysosporium keratinophylum on Toxocara canis eggs

Abstract

The degree of antagonism exercised by fungi on geohelminth development varies according to the morphological alterations caused by different fungal species. Saprophytic fungi may exert ovicidal or ovistatic effects. The aim of this study was to apply scanning electron microscopy (SEM) to observe the action of two soil saprophytic species of Chrysosporium (C. indicum and C. keratinophylum) on Toxocara canis eggs. The fungal strains to be tested were incubated for 28 days at 28 °C in 2% water agar with a suspension of unembryonated T. canis eggs. A suspension of T. canis eggs in 2% water agar was used as control group. The assay was done in triplicate for each fungus and the control group. SEM observations were performed on the 4th, 7th, 14th, 21st, and 28th day after inoculation. The effect of the fungi on eggs was evaluated in accordance with the alterations observed on the surface and the changes in the normal characteristics of the eggs. Hyphae around the eggs, appresoria penetrating the shell and changes in the typical egg membrane were observed in this assay. Type 3 effect (alterations that occur both in the embryo and the shell, and hyphal penetration of the eggs) was the prevalent effect. SEM allowed us to observe clearly the morphological alterations in T. canis eggs due to the effect of C. indicum and C. keratinophylum. Both saprophytic species of Chrysosporium alter the egg structure and alterations increase as exposure increases.

El grado de antagonismo ejercido por los hongos sobre el desarrollo de los geohelmintos depende de la especie fúngica y las alteraciones morfológicas que causan. Los hongos saprófitos pueden tener efecto ovicida u ovistático sobre los huevos. El objetivo fue aplicar la microscopía electrónica de barrido (MEB) para observar la acción de 2 especies de Chrysosporium (C. indicum y C. keratinophylum) saprófitas de suelos, sobre huevos de Toxocara canis. Las especies a ensayar se sembraron en agar agua al 2% con una suspensión de huevos no embrionados de T. canis y se incubaron 28 días a 28 °C. Como grupo control se utilizó una suspensión de huevos de T. canis en agar agua al 2%. El ensayo se realizó por triplicado para cada hongo y el grupo control. Las observaciones con MEB se realizaron a los 4, 7, 14, 21 y 28 días de incubación. La acción de los hongos se evaluó según las alteraciones en la superficie y los cambios en las características normales de los huevos. En este ensayo se observaron: hifas rodeando los huevos, appresorios penetrando la cubierta y cambios en la membrana característica del huevo, prevaleciendo el efecto tipo 3 (alteraciones que se producen tanto en el embrión como en la cubierta y penetración de hifas al interior de los huevos). La aplicación de la MEB permitió observar claramente que las 2 especies de Chrysosporium saprófitas de suelos, afectan el normal desarrollo de los huevos de T. canis, alteran su estructura y las alteraciones aumentan con el tiempo de exposición.