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dc.contributor.author
Elena, Claudia Edicht
dc.contributor.author
Ravasi, Pablo
dc.contributor.author
Cerminati, Sebastián
dc.contributor.author
Peirú, Salvador
dc.contributor.author
Castelli, Maria Eugenia
dc.contributor.author
Menzella, Hugo Gabriel
dc.date.available
2018-07-23T19:43:49Z
dc.date.issued
2016-12
dc.identifier.citation
Elena, Claudia Edicht; Ravasi, Pablo; Cerminati, Sebastián; Peirú, Salvador; Castelli, Maria Eugenia; et al.; Pichia pastoris engineering for the production of a modified phospholipase C; Elsevier; Process Biochemistry; 51; 12; 12-2016; 1935-1944
dc.identifier.issn
1359-5113
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/52892
dc.description.abstract
Crude vegetable oils are refined to remove impurities that adversely impact in their stability, color and flavor. In recent years, enzymatic degumming methods using phospholipase C (PLC) enzymes provide an environmentally friendly process for phospholipids removal with improved oil recovery yields. In this study, Pichia pastoris was used as the expression system for the production of PLC-Y, a modified PLC enzyme derived from Bacillus cereus. Production of secreted PLC-Y driven by the methanol inducible AOX1 promoter was optimized by genetic strain engineering which included gene codon optimization, generation of multi-copy chromosomal integrations and the co-expression of helper factors supporting protein folding, processing and secretion processes. In addition, tunable promoters directing helper factor expression were tested. In batch cultures, a strain harboring seven integrated copies of the PLC-Y expression cassette and co-expressing the HAC1 transcription factor under an attenuated AOX1 promoter showed a 6.2 fold increase in the production titers compared to the strain harboring a single gene copy. A fed-batch fermentation process developed using this engineered strain produced 4.5 g/l of this enzyme. The results presented in this work show the viability of using PLC-Y for oil degumming and provide a manufacturing process for its cost effective production.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Elsevier
dc.rights
info:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
Enzymatic Degumming
dc.subject
Green Chemistry
dc.subject
Phospholipase C
dc.subject
Pichia Pastoris
dc.subject
Recombinant Protein Production
dc.subject.classification
Biotecnología Industrial
dc.subject.classification
Biotecnología Industrial
dc.subject.classification
INGENIERÍAS Y TECNOLOGÍAS
dc.title
Pichia pastoris engineering for the production of a modified phospholipase C
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2018-07-23T12:56:27Z
dc.journal.volume
51
dc.journal.number
12
dc.journal.pagination
1935-1944
dc.journal.pais
Países Bajos
dc.journal.ciudad
Amsterdam
dc.description.fil
Fil: Elena, Claudia Edicht. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Ravasi, Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Cerminati, Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Peirú, Salvador. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Castelli, Maria Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Menzella, Hugo Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Procesos Biotecnológicos y Químicos Rosario; Argentina
dc.journal.title
Process Biochemistry
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1016/j.procbio.2016.08.022
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1359511316303373


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