Actividad quitinolítica de aislamientos de Trichoderma para el control de Sclerotinia sclerotiorum

Abstract

Sclerotinia sclerotiorum representa un serio problema para el cultivo de hortalizas en el Noroeste argentino. Se trata de un fi topatógeno capaz de desarrollar estructuras de resistencia llamadas esclerocios. Dichas estructuras son fuente de inóculo ya que pueden germinar generando nuevas infecciones. Los esclerocios son vulnerables al ataque de microorganismos, por lo tanto el objetivo de este trabajo fue caracterizar aislamientos de Trichoderma por su producción de enzimas que faciliten el parasitismo de esclerocios. A partir de esclerocios parasitados naturalmente y también empleando la técnica de “esclerocios trampa” se obtuvieron 19 aislamientos de Trichoderma , los cuales fueron identifi cados a nivel de especie por secuenciación del gen tef1a. Cada aislamiento se sembró en medio YNB, con paredes de hongos (1mg/ml) como fuente de carbono, fomentando la producción de enzimas. Los cultivos se incubaron durante 6 días a 25 ± 2 °C y se determinó actividad quitinolítica empleando como sustrato paranitrofenilNacetilglusamidina. Relacionando la absorbancia obtenida a 405 nm con los moles de p-nitrofenol liberado por minuto, se estimó las unidades de enzima (UE) producida por cada aislamiento. Los datos fueron analizados estadísticamente mediante test de Fisher (LSD) y ANOVA. Todos los aislamientos evaluados produjeron enzimas capaces de degradar paredes de hongo, destacándose signifi cativamente T. atroviride 6, T. atroviride 21, T.koningiopsis 17, T. longibrechiatum 11, con medias de 10 a 8,9 UE/ ml respectivamente. Dichos resultados demuestran que todos los aislamientos tienen capacidad enzimática para degradar esclerocios y que la concentración de enzimas producida depende de cada aislamiento en particular.